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- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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大量
- 英文名：
Situ TUNEL Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海信誉
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
产品询价：你可以通过电话，邮件，传真或在线客户方式询价
检测种属：大小鼠，人，猪，豚鼠,兔子，牛，羊，鸡，鸭Elisa试剂盒等种属
产品样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆，心房水标本等。
贮藏条件：试剂盒保存2-8℃，有效期6个月
TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒 （荧光及显色法，细胞样本）安全性：1，避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4．试剂应按标签 说 明 书 储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。5．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。6．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。8．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。11．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。12．按照 说 明 书 中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒 （荧光及显色法，细胞样本）说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文 说 明 书 可能会有不一致之处，请以英文 说 明 书 为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒 （荧光及显色法，细胞样本）何影响。
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡，其中 TUNEL 法做的最多，我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司，结果大多数成功，偶尔也有失败，下面我把实验中的关键问题与大家共享一下，同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理：对不同组织切片先增加细胞膜通透性，然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内，在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合，再用 HRP 标记的链霉
细胞仪检测。 二、荧光显微镜原位检测 注：本方法优点是可以原位观察细胞凋亡，缺点是部分凋亡由于贴壁不牢而检测不到。 如果条件可以，在诱导凋亡后，用多孔板离心机300 g离心5 min。 吸除细胞培养液，用PBS洗涤两次（如果条件允许，在此前做步骤A）。 离心后弃上清，加入500 μL稀释成1 × 的Annexin V Binding Buffer工作液。 加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5μL的细胞核染色液。 移液器轻轻混匀，室温避光孵育15~20 min。 Annexin V Binding
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