Calpain 1 Large Subunit抗体(兔多抗)

WB, Western blot; IF, Immunofluorescence.
H, human; M, mouse; R, rat.
本Calpain 1 large subunit抗体(Calpain 1 large subunit antibody)为进口分装，用人工合成的人Calpain 1 large subunit一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本Calpain 1 large subunit抗体可以检测内源性calpain 1 large subunit，也可以检测calpain 1 large subunit在Leu28位剪切产生的片段(calpain 1 large subunit autoproteolytically cleaved at Leu28)。
Calpains是一类定位在细胞浆中，高度保守的，并且在哺乳动物组织中广泛存在的Ca²⁺依赖的半胱氨酸蛋白酶。有功能活性的calpain是由一个30kDa的调节亚基和一个80kDa左右的催化亚基组成的异源二聚体。Calpain 1和calpain 2的30kDa小亚基是相同的，但80kDa的大亚基则不同。在体外，calpain 1的激活需要微摩尔(μM)浓度的钙离子，calpain 2的激活则需要毫摩尔(mM)浓度的钙离子，因此calpain 1也被称为mu-calpain或μ-calpain，而calpain 2也被称为m-calpain。目前已有大量的关于calpain的活性调节的研究，表明其蛋白酶活性主要为转录后调节，机制主要有钙离子浓度调控、异源二聚体的亚细胞定位、通过EGFR-Erk信号通路诱导的磷酸化、内源性抑制剂(calpastatin)和自身剪切。Calpastatin可以抑制calpain在Gly27和Leu28之间的自身剪切。Calpains剪切的蛋白底物包括生长因子受体或激素受体、蛋白激酶、磷酸酯酶和细胞骨架蛋白等。Calpain可以影响细胞粘附和细胞骨架重排。Calpain可以通过激活Rac1和RhoA，影响focal adhesion形成，影响细胞的铺展和迁移(spreading and migration)。Calpain活性的控制受到药品开发研究的关注，calpain活性的抑制可以减缓肿瘤侵袭或改善慢性炎症。目前还发现calpain和2型糖尿病、神经退行性疾病、肌肉萎缩症、脑缺血和脑损伤有关。
配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：

本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。
包装清单：

保存条件：
Calpain1 large subunit抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：
对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. Western检测：
A. 按照1:1000用再康生物提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜，确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗，4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。
2. 免疫染色：
可以使用再康生物生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体，使用后注意回收稀释好的一抗，
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。