Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针)

Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针)

Mito-Tracker Green，也称MitoTracker Green，是一种线粒体(mitochondria)绿色荧光探针，可以用于活细胞线粒体特异性荧光染色。
Mito-Tracker Green为采用Molecular Probes公司的carbocyanine进行了荧光标记的一种Mito-Tracker， 也称Benzoxazolium, 2-[3-[5,6-dichloro-1,3-bis[[4-(chloromethyl)phenyl]methyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-ylidene]-1-propenyl]-3-methyl-, chloride。分子式为C₃₄H₂₈Cl₅N₃O，分子量为671.88，CAS number为201860-17-5，可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相比，Mito-Tracker Green对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位。
Mito-Tracker Green只可以用于对活细胞的染色，细胞经过固定后会导致荧光会消失。Mito-Tracker Green对活细胞的染色效果参考图1。

图1. Mito-Tracker Green对HeLa细胞活染效果图。左侧为HeLa细胞在明场下的形态图；中间为HeLa细胞孵育Hoechst 33342(蓝) 10min和Mito-Tracker Green(绿) 30min后在荧光显微镜下的实拍效果；右侧图为HeLa双染Hoechst 33342和Mito-Tracker Green效果图。

Mito-Tracker Green最大激发光波长为490nm，最大发射波长为516nm，呈绿色荧光，Mito-Tracker Green的结构式以及激发光谱和发射光谱参考图2。

 

 

图2. Mito-Tracker Green的结构式(左)以及激发光谱和发射光谱(右)。

按最终工作浓度为20-200nM计算，可以配制约370-3700ml Mito-Tracker Green工作液。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
ZK-1048	Mito-Tracker Green	50μg
－	说 明 书	1份

保存条件：
-20℃避光保存，半年有效。
注意事项：
Mito-Tracker Green可以用于活细胞的线粒体荧光标记，但不适合用于固定细胞的标记。
对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
需自备盖玻片和载玻片(可以向再康生物订购)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. Mito-Tracker Green储存液的配制：
用无水DMSO(anhydrous dimethylsulfoxide)配制Mito-Tracker Green至终浓度为1mM。配制后可以-20℃或更低温度避光保存。
2. Mito-Tracker Green工作液的配制：
a. 取少量1mM Mito-Tracker Green储存液按照1:5000-1:50000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中，使最终浓度为20-200nM。例如取1μl Mito-Tracker Green加入到50ml或5ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中。混匀后即为Mito-TrackerGreen工作液。 HBSS with Ca²⁺ & Mg²⁺ (C0219)可以向再康生物订购。
b. Mito-Tracker Green工作液使用前需37℃预温育。
注：工作液中Mito-Tracker Green的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Green。
3. 线粒体的荧光标记：
a. 去除细胞培养液，加入步骤2配制好的并37℃预温育的Mito-Tracker Green染色工作液，与细胞37℃共孵育15-45分钟。
b. 去除Mito-Tracker Green染色工作液，加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Mito-Tracker Green染色工作液中Mito-Tracker Green的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。