人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 检测试

人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用

试验原理：

VE-cad试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知VE-cad浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将VE-cad和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中VE-cad的活性浓度呈比例关系。

人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 检测试剂盒试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签 说 明 书 储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照 说 明 书 中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 检测试剂盒试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的VE-cad标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的VE-cad含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400ng/ml

4、敏感度： 1.0ng/ml
ZK-EL-H1563c 人蛋白二硫化物异构酶A6(PDIA6)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit
ZK-EL-H1564c 人红细胞衍生核因子2样蛋白2(NFE2L2)ELISA试剂盒 说 明 书 Human NFE2L2 (Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like 2) ELISA Kit
ZK-EL-H1565c 人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒 说 明 书 Human HDL (High Density Lipoprotein) ELISA Kit
ZK-EL-H1566c 人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒 说 明 书 Human DNP-Ab (Deozkribonucleic Protein Antibody) ELISA Kit
ZK-EL-H1567c 人乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 说 明 书 Human HBsAg (Hepatitis B surface antigen) ELISA Kit
ZK-EL-H1571c 人基质金属蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)ELISA试剂盒 说 明 书 Human Pro-MMP-10 (Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit
ZK-EL-H1572c 人基质金属蛋白酶原13 (Pro-MMP-13)ELISA试剂盒 说 明 书 Human Pro-MMP-13 (Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit
ZK-EL-H1573c 人信号调节蛋白α(SIRPA)ELISA试剂盒 说 明 书 Human SIRPA (Signal Regulatory Protein Alpha) ELISA Kit
ZK-EL-H1574c 人血浆五聚蛋白3 (PTX 3/TSG-14)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PTX 3/TSG-14 (Pentraxin 3, Long) ELISA Kit
ZK-EL-H1575c 人血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PDGF-AA (Platelet Derived Growth Factor-AA) ELISA Kit
ZK-EL-H1576c 人血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit
ZK-EL-H1577c 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit
ZK-EL-H1579c 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒 说 明 书 Human PCSK9 (Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9) ELISA Kit
ZK-EL-H1581c 人视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒 说 明 书 Human RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit
ZK-EL-H1582c 人松弛肽2(RLN2)ELISA试剂盒 说 明 书 Human RLN2 (Relaxin-2) ELISA Kit
ZK-EL-H1583c 人视黄醇结合蛋白1(RBP1)ELISA试剂盒 说 明 书 Human RBP1 (Retinol Binding Protein 1, Cellular) ELISA Kit
ZK-EL-H1584c 人生存素(Surv)ELISA试剂盒 说 明 书 Human Surv (Survivin) ELISA Kit
ZK-EL-H1585c 人视黄醇结合蛋白3(RBP3)ELISA试剂盒 说 明 书 Human RBP3 (Retinol Binding Protein 3, Interstitial) ELISA Kit
ZK-EL-H1586c 人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit
ZK-EL-H1587c 人转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TGF-β2 (Transforming Growth Factor β2) ELISA Kit
ZK-EL-H1588c 人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit
ZK-EL-H1589c 人血小板反应蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit
ZK-EL-H1590c 人血小板反应蛋白2(TSP-2)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit
ZK-EL-H1592c 人白介素7受体(IL7R)ELISA试剂盒 说 明 书 Human IL7R (Interleukin 7 Receptor) ELISA Kit
ZK-EL-H1593c 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/TNFSF10)ELISA试剂盒 说 明 书 Human TRAIL/TNFSF10 (Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit