pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-C-BFP是再康生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含BFP(Blue FluorescentProtein,蓝色荧光蛋白)标
签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个BFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有BFP标签的融合蛋白。利用BFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用BFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。BFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测BFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-BFP质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Multiple cloning site	651-740
BFP	741-1460
T7 promoter and T7 primer binding site	1510-1531
SV40 polyA signal	1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication	2064-2370
bla promoter	2395-2519
SV40 promoter	2539-2877
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3704-4162
pUC origin	4291-4958

pCMV-C-BFP质粒(5010bp)的图谱如下：

pCMV-C-BFP的多克隆位点的详细图谱如下：

SmaI PstI
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651	GAGCTCCACC	GCGGTGGCGG	CCGCTCTAGC	CCGGGCGGAT	CCAAGCTTCT
	CTCGAGGTGG	CGCCACCGCC	GGCGAGATCG	GGCCCGCCTA	GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI BFP
701	GCAGGAATTC	GATATCGTCG	ACAGATCTCT	CGAGTCTAGA	ATGGTGAGCA
	CGTCCTTAAG	CTATAGCAGC	TGTCTAGAGA	GCTCAGATCT	TACCACTCGT
751	AGGGCGAGGA	GCTGTTCACC	GGGGTGGTGC	CCATCCTGGT	CGAGCTGGAC
	TCCCGCTCCT	CGACAAGTGG	CCCCACCACG	GGTAGGACCA	GCTCGACCTG
801	GGCGACGTAA	ACGGCCACAA	GTTCAGCGTG	TCCGGCGAGG	GCGAGGGCGA
	CCGCTGCATT	TGCCGGTGTT	CAAGTCGCAC	AGGCCGCTCC	CGCTCCCGCT
851	TGCCACCTAC	GGCAAGCTGA	CCCTGAAGTT	CATCTGCACC	ACCGGCAAGC
	ACGGTGGATG	CCGTTCGACT	GGGACTTCAA	GTAGACGTGG	TGGCCGTTCG
901	TGCCCGTGCC	CTGGCCCACC	CTCGTGACCA	CCCTGAGCCA	CGGCGTCCAG
	ACGGGCACGG	GACCGGGTGG	GAGCACTGGT	GGGACTCGGT	GCCGCAGGTC
951	TGCTTCAGCC	GCTACCCCGA	CCACATGAAG	CAGCACGACT	TCTTCAAGTC
	ACGAAGTCGG	CGATGGGGCT	GGTGTACTTC	GTCGTGCTGA	AGAAGTTCAG
1001	CGCCATGCCC	GAAGGCTACG	TCCAGGAGCG	CACCATCTTC	TTCAAGGACG
	GCGGTACGGG	CTTCCGATGC	AGGTCCTCGC	GTGGTAGAAG	AAGTTCCTGC
1051	ACGGCAACTA	CAAGACCCGC	GCCGAGGTGA	AGTTCGAGGG	CGACACCCTG
	TGCCGTTGAT	GTTCTGGGCG	CGGCTCCACT	TCAAGCTCCC	GCTGTGGGAC
1101	GTGAACCGCA	TCGAGCTGAA	GGGCATCGAC	TTCAAGGAGG	ACGGCAACAT
	CACTTGGCGT	AGCTCGACTT	CCCGTAGCTG	AAGTTCCTCC	TGCCGTTGTA
1151	CCTGGGGCAC	AAGCTGGAGT	ACAACTTCAA	CAGCCACAAC	GTCTATATCA
	GGACCCCGTG	TTCGACCTCA	TGTTGAAGTT	GTCGGTGTTG	CAGATATAGT
1201	TGGCCGACAA	GCAGAAGAAC	GGCATCAAGG	CGAACTTCAA	GATCCGCCAC
	ACCGGCTGTT	CGTCTTCTTG	CCGTAGTTCC	GCTTGAAGTT	CTAGGCGGTG
1251	AACATCGAGG	ACGGCAGCGT	GCAGCTCGCC	GACCACTACC	AGCAGAACAC
	TTGTAGCTCC	TGCCGTCGCA	CGTCGAGCGG	CTGGTGATGG	TCGTCTTGTG
1301	CCCCATCGGC	GACGGCCCCG	TGCTGCTGCC	CGACAGCCAC	TACCTGAGCA
	GGGGTAGCCG	CTGCCGGGGC	ACGACGACGG	GCTGTCGGTG	ATGGACTCGT
1351	CCCAGTCCGC	CCTGAGCAAA	GACCCCAACG	AGAAGCGCGA	TCACATGGTC
	GGGTCAGGCG	GGACTCGTTT	CTGGGGTTGC	TCTTCGCGCT	AGTGTACCAG
1401	CTGCTGGAGT	TCGTGACCGC	CGCCGGGATC	ACTCTCGGCA	TGGACGAGCT
	GACGACCTCA	AGCACTGGCG	GCGGCCCTAG	TGAGAGCCGT	ACCTGCTCGA
ApaI
1451	GTACAAGTAA	GGGCCCGGTA	CCTTAATTAA	TTAAGGTACC	AGGTAAGTGT
	CATGTTCATT	CCCGGGCCAT	GGAATTAATT	AATTCCATGG	TCCATTCACA

pCMV-C-BFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-BFP)包括：

AclI	AfeI	AflII	AgeI	AhdI	AscI	AsiSI
BaeI	BbsI	BbvCI	BlpI	BmgBI	BsiWI	BsmBI
BspEI	BspQI	BssHII	BstEII	BstZ17I	EarI	EcoNI
FseI	NruI	PflMI	PmeI	PmlI	PpuMI	PshAI
PspXI	SapI	Sbf I	ScaI	SgrAI	SpeI	SwaI
XcmI	XmnI

pCMV-C-BFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-BFP once)包括：

NdeI	CA`TA,TG	240		ApaII	G,GGCC`C	1461
SnaBI	TAC|GTA	346		PvuI	CG,AT`CG	1541
CspCI	,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`	380		BclI	T`GATC,A	1697
NheI	G`CTAG,C	597		MfeI	C`AATT,G	1790
BmtI	G,CTAG`C	597		HpaI	GTT|AAC	1803
SacI	G,AGCT`C	651		BtsI	GCAGTG,NN`	1877
Eco53kI	GAG|CTC	653		MluI	A`CGCG,T	1926
BstXI	CCAN,NNNN`NTGG	659		BsaXI	,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`	2087
SacII	CC,GC`GG	660		DraIII	CAC,NNN`GTG	2153
NotI	GC`GGCC,GC	668		SfiI	GGCCN,NNN`NGGCC	2812
TspMI	C`CCGG,G	680		StuI	AGG|CCT	2861
XmaI	C`CCGG,G	680		ClaI	AT`CG,AT	2880
SmaI	CCC|GGG	682		BspDI	AT`CG,AT	2880
BamHI	G`GATC,C	687		KasI	G`GCGC,C	3039
HindIII	A`AGCT,T	693		NarI	GG`CG,CC	3040
PstI	C,TGCA`G	699		SfoI	GGC|GCC	3041
EcoRI	G`AATT,C	705		PluTI	G,GCGC`C	3039
EcoRV	GAT|ATC	713		MscI	TGG|CCA	3122
SalI	G`TCGA,C	717		Tth111I	GACN`N,NGTC	3158
AccI	GT`MK,AC	718		PflFI	GACN`N,NGTC	3158
BglII	A`GATC,T	723		BsrDI	GCAATG,NN`	3271
XhoI	C`TCGA,G	729		RsrII	CG`GWC,CG	3556
PaeR7I	C`TCGA,G	729		BstBI	TT`CG,AA	3722
XbaI	T`CTAG,A	735		BsaI	GGTCTCN`NNNN,	4029
BcgI	,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`	829		ApaLI	G`TGCA,C	4644
BsrGI	T`GTAC,A	1450		PciI	A`CATG,T	4958
PspOMI	G`GGCC,C	1461

pCMV-C-BFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-BFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-BFP的全序列信息：D2621 pCMV-C-BFP-seq.txt
pCMV-C-BFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。

   
图1. pCMV-C-BFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
ZK-2621-1μg	pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)	1μg
ZK-2621-100μg	pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)	100μg
—	说 明 书	1份

保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经再康生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。