pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒)

pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒)

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  • ¥888
  • 再康生物/ZK-Bioscience
  • ZK-0044682
  • 进口/国产
  • 2025年11月20日
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      50

    • 英文名

      pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海再康生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃保存。

    pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒)

    pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒)是再康生物自行研发的用于检测TNF-α promoter转录活性水平的报告基因质粒。
    pTNF-α-promoter-luc是以再康生物的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human TNF-α的启动子序列(-991bp~+1bp),可以高灵敏度地检测human TNF-α promoter的激活水平。
    TNF-α(Tumor Necrosis Factor α),中文名为肿瘤坏死因子α,是一种非常重要的炎性细胞因子,在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
    pTNF-α-promoter-luc质粒的主要信息如下:

    Base pairs 6555
    hTNF-α promoter 20-1010
    luc2 reporter gene 1056-2708
    SV40 late poly(A)signal 2743-2964
    SV40 early enhancer/promoter 3012-3430
    Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region 3455-4249
    Synthetic poly(A)signal 4274-4322
    Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region 4389-4408
    ColE1-derived plasmid replication origin 4646
    Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region 5437-6297
    Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site 6402-6555
    Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region 6504-6523

    pTNF-α-promoter-luc质粒的图谱如下:

    pTNF-α-promoter-luc的多克隆位点及TNF-α promoter的详细图谱如下:

      BglI KpnI TNF-α promoter
     
    1 GGCCTAACTG
    GCCGGTACC A
    GCTCCTGGGA GATATGGCCA CATGTAGCGG
     
      CCGGATTGAC
    CGGCCATGG T
    CGAGGACCCT CTATACCGGT GTACATCGCC
     
    51 CTCTGAGGAA TGGGTTACAG GAGACCTCTG GGGAGATGTG ACCACAGCAA
     
      GAGACTCCTT ACCCAATGTC CTCTGGAGAC CCCTCTACAC TGGTGTCGTT
     
    101 TGGGTAGGAG AATGTCCAGG GCTATGGAAG TCGAGTATGG GGACCCCCCC
     
      ACCCATCCTC TTACAGGTCC CGATACCTTC AGCTCATACC CCTGGGGGGG
     
    151 TTAACGAAGA CAGGGCCATG TAGAGGGCCC CAGGGAGTGA AAGAGCCTCC
     
      AATTGCTTCT GTCCCGGTAC ATCTCCCGGG GTCCCTCACT TTCTCGGAGG
     
    201 AGGACCTCCA GGTATGGAAT ACAGGGGACG TTTAAGAAGA TATGGCCACA
     
      TCCTGGAGGT CCATACCTTA TGTCCCCTGC AAATTCTTCT ATACCGGTGT
     
    251 CACTGGGGCC CTGAGAAGTG AGAGCTTCAT GAAAAAAATC AGGGACCCCA
     
      GTGACCCCGG GACTCTTCAC TCTCGAAGTA CTTTTTTTAG TCCCTGGGGT
     
    301 GAGTTCCTTG GAAGCCAAGA CTGAAACCAG CATTATGAGT CTCCGGGTCA
     
      CTCAAGGAAC CTTCGGTTCT GACTTTGGTC GTAATACTCA GAGGCCCAGT
    EcoRI XmaI/SmaI
     
    351 GAATGAAAGA AGAAGGCCTG CCCCAGTGGG GTCTGTGAAT TCCCGGGGGT
     
      CTTACTTTCT TCTTCCGGAC GGGGTCACCC CAGACACTTA AGGGCCCCCA
     
    XmaI/SmaI
     
    401 GATTTCACTC CCCGGGGCTG TCCCAGGCTT GTCCCTGCTA CCCCCACCCA
     
      CTAAAGTGAG GGGCCCCGAC AGGGTCCGAA CAGGGACGAT GGGGGTGGGT
     
    451 GCCTTTCCTG AGGCCTCAAG CCTGCCACCA AGCCCCCAGC TCCTTCTCCC
     
      CGGAAAGGAC TCCGGAGTTC GGACGGTGGT TCGGGGGTCG AGGAAGAGGG
     
    501 CGCAGGGACC CAAACACAGG CCTCAGGACT CAACACAGCT TTTCCCTCCA
     
      GCGTCCCTGG GTTTGTGTCC GGAGTCCTGA GTTGTGTCGA AAAGGGAGGT
     
    551 ACCCCGTTTT CTCTCCCTCA AGGACTCAGC TTTCTGAAGC CCCTCCCAGT
     
      TGGGGCAAAA GAGAGGGAGT TCCTGAGTCG AAAGACTTCG GGGAGGGTCA
     
    601 TCTAGTTCTA TCTTTTTCCT GCATCCTGTC TGGAAGTTAG AAGGAAACAG
     
      AGATCAAGAT AGAAAAAGGA CGTAGGACAG ACCTTCAATC TTCCTTTGTC
     
    651 GCCACAGACC TGGTCCCCAA AAGAAATGGA GGCAATAGGT TTTGAGGGGC
     
      CGGTGTCTGG ACCAGGGGTT TTCTTTACCT CCGTTATCCA AAACTCCCCG
     
    701 ATGGGGACGG GGTTCAGCCT CCAGGGTCCT ACACACAAAT CAGTCAGTGG
     
      TACCCCTGCC CCAAGTCGGA GGTCCCAGGA TGTGTGTTTA GTCAGTCACC
     
    751 CCCAGAAGAC CCCCCTCGGA ATCGGAGCAG GGAGGATGGG GAGTGTGAGG
     
      GGGTCTTCTG GGGGGAGCCT TAGCCTCGTC CCTCCTACCC CTCACACTCC
     
    801 GGTATCCTTG ATGCTTGTGT GTCCCCAACT TTCCAAATCC CCGCCCCCGC
     
      CCATAGGAAC TACGAACACA CAGGGGTTGA AAGGTTTAGG GGCGGGGGCG
     
    851 GATGGAGAAG AAACCGAGAC AGAAGGTGCA GGGCCCACTA CCGCTTCCTC
     
      CTACCTCTTC TTTGGCTCTG TCTTCCACGT CCCGGGTGAT GGCGAAGGAG
     
    SacI  
     
    901 CAGATGAGCT CATGGGTTTC TCCACCAAGG AAGTTTTCCG CTGGTTGAAT
     
      GTCTACTCGA GTACCCAAAG AGGTGGTTCC TTCAAAAGGC GACCAACTTA
     
    951 GATTCTTTCC CCGCCCTCCT CTCGCCCCAG GGACATATAA AGGCAGTTGT
     
      CTAAGAAAGG GGCGGGAGGA GAGCGGGGTC CCTGTATATT TCCGTCAACA
     
    PstI
    -1BglIIHindIII
     
    1001
    TGGCACACCC  
    AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG
     
     
    ACCGTGTGGG  
    TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC

    pTNF-α-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-luc)包括:

    Aat II Afl II Asc I Ase I BsaA I BsiW I BspM II
    BssH II Eco72 I EcoR V Mlu I Nde I Nhe I Nru I
    PaeR7 I Pme I Pml I Psp1406 I Rsr II SnaB I Spl I
    Srf I Vsp I Xcm I Xho I  

    pTNF-α-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut ppTNF-α-promoter-luc once)包括:

    Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9   EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3930
    Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9   BsiC I TT`CG,AA 4325
    Acc65 I G`GTAC,C 15   BstB I TT`CG,AA 4325
    Asp718 G`GTAC,C 15   Sal I G`TCGA,C 4339
    Kpn I G,GTAC`C 19   ApaL I G`TGCA,C 4903
    Bsa I GGTCTC 7/11 66   HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 5168
    EcoR I G`AATT,C 388   Not I GC`GGCC,GC 5409
    Tth111 I GACN`N,NGTC 661   BstE II G`GTNAC,C 5436
    Sac I G,AGCT`C 911   Ahd I GACNN,N`NNGTC 5511
    Bgl II A`GATC,T 1012   Pvu I CG,AT`CG 5881
    Hind III A`AGCT,T 1022   Sac II CC,GC`GG 5905
    BsrG I T`GTAC,A 1547   Bst1107 I GTA|TAC 6021
    Dra III CAC,NNN`GTG 2203   Xca I GTA|TAC 6021
    Mun I C`AATT,G 2883   Spe I A`CTAG,T 6340
    BamH I G`GATC,C 2976   BsmB I CGTCTC 7/11 6353

    pTNF-α-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(6504-6523):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pTNF-α-promoter-luc的全序列信息: D2480-pTNF-α-promoter-luc-seq.txt
    包装清单:

    产品编号 产品名称 包装
    ZK-2480-1μg pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg
    ZK-2480-100μg pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒) 100μg
    说 明 书 1份

    保存条件:
    -20℃保存。
    注意事项:
    本质粒未经再康生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:
    1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
    3. pTNF-α-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用再康生物的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
    4. LPS等是常见的可以激活TNF-α的转录的试剂,可以用作pTNF-α-promoter-luc报告基因检测时的阳性对照。

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