ASM Antibody

ASM Antibody提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，ASM Antibody加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. ASM Antibody用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，ASM Antibody一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
ASM Antibody其它相关产品展示：zkB409Ra 大鼠血红蛋白(HB)ELISA试剂盒 检测范围
zkB769Ra 大鼠S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA试剂盒 检测范围
zkC046Ra 大鼠S100钙结合蛋白A10(S100A10)ELISA试剂盒 检测范围
zkF358Ra 大鼠热休克蛋白β6(HSPβ6)ELISA试剂盒 检测范围
zkF822Ra 大鼠磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)ELISA试剂盒 检测范围
zkJ786Ra 大鼠羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ)ELISA试剂盒 检测范围
zkD545Ra 大鼠细胞色素P450家族成员11A1(CYP11A1)ELISA试剂盒 检测范围
zkD021Ra 大鼠重肽铁蛋白(FTH)ELISA试剂盒 检测范围
zkD251Ra 大鼠线粒体铁蛋白(FTMT)ELISA试剂盒 检测范围
zkE426Ra 大鼠二价金属转运蛋白1(DMT1)ELISA试剂盒 检测范围
zkH789Ra 大鼠铁反应元件结合蛋白2(IREB2)ELISA试剂盒 检测范围
zkJ683Ra 大鼠顺乌头酸酶1(ACO1)ELISA试剂盒 检测范围
zkD759Ra 大鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)ELISA试剂盒 检测范围
zkH326Ra 大鼠Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA试剂盒 检测范围
zkC206Ra 大鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)ELISA试剂盒 检测范围
zkB919Ra 大鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒 检测范围
zkJ769Ra 大鼠视网膜血管瘤肿瘤抑制因子(vHL)ELISA试剂盒 检测范围
zkG888Ra 大鼠锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1)ELISA试剂盒 检测范围
zkH984Ra 大鼠糖蛋白A33(GPA33)ELISA试剂盒 检测范围
zkD337Ra 大鼠阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1α(SCNN1α)ELISA试剂盒 检测范围
zkB185Ra 大鼠葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒 检测范围
zkC825Ra 大鼠促甲状腺素受体(TSHR)ELISA试剂盒 检测范围
zkJ817Ra 大鼠非转移细胞1表达NM23A蛋白(NME1)ELISA试剂盒 检测范围
zkC469Ra 大鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)ELISA试剂盒 检测范围
zkB887Ra 大鼠Apelin 13蛋白(AP13)ELISA试剂盒 检测范围
zkB635Ra 大鼠葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒 检测范围
zkA971Ra 大鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA试剂盒 检测范围
zkH821Ra 大鼠白介素18结合蛋白(IL18BP)ELISA试剂盒 检测范围
zkM285Ra 大鼠类固醇5α还原酶2(SRD5α2)ELISA试剂盒 检测范围
zkE190Ra 大鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素1(PCSK1)ELISA试剂盒 检测范围
zkH339Ra 大鼠骨膜蛋白(POSTN)ELISA试剂盒 检测范围
zkQ301Ra 大鼠NADH脱氢酶1(ND1)ELISA试剂盒 检测范围