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文献和实验定量的方法。 实时荧光定量 PCR 是目前确定样品中 DNA(或 cDNA) 拷贝数最敏感、最准确的方法。如果用于 RNA 检测,这被称为逆转录实时 PCR 即(Real-time RT-PCR)是实时 PCR 法,它是指对 DNA 或经过反转录(RT-PCR)的 RNA 通过聚合酶链式反应并实时监测 DNA 的放大过程,在扩增的指数增长期就测量扩增产物,因为扩增指数增长期测量值与特异 DNA(RNA)起始量存在相关性,从而实现定量检测。 RealTime PCR 的基本目标是精确
实时荧光定量 PCR 技术(Quantitative Real-time PCR,简称 qPCR)是在 PCR 扩增过程中,通过实时监测荧光信号的变化,达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断,动物疾病监测,食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延,qPCR 技术更是因其检测通量高,速度快,操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果,我们需要注意哪些方面呢?其实决定一次实验成功
一些不必要的重复劳动,从而一战成功(即使不是一战,也少了 n 战)。 RT-PCR 虽然只是逆转 RNA,但却是决定后续 qPCR 或其他实验成功的关键因素,是重中之重。以下几点 tips 请查收: 1. 提取好的 RNA,先检测质量 对 RNA 质量的检测包含 RNA 完整度测定及 RNA 产量测定两部分: (1)RNA 的完整度对 cDNA 的合成结果会产生重要的影响。 通过琼脂糖凝胶电泳进行检测是方法之一,这也是一般实验室最常用的方法。通常完整的真核 RNA 应包括 28S、18
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