STEP (23E5) Mouse mAb

STEP (23E5) Mouse mAb提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，STEP (23E5) Mouse mAb加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. STEP (23E5) Mouse mAb用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，STEP (23E5) Mouse mAb一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
STEP (23E5) Mouse mAb其它相关产品展示：zkJ266Hu Diablo同源物(DIABLO)检测试剂盒 检测范围
zkH027Hu Thimet脱寡肽酶1(THOP1)检测试剂盒 检测范围
zkJ331Hu 酪蛋白κ(CSN3)检测试剂盒 检测范围
zkJ333Hu 酪蛋白α(CSN1)检测试剂盒 检测范围
AEB464Hu 抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)检测试剂盒 检测范围
zkB191Hu 泌乳素(PL)检测试剂盒 检测范围
zkB571Hu 胸腺激活调节趋化因子(TARC)检测试剂盒 检测范围
zkD477Hu 岩藻糖苷酶αL2(FUCα2)检测试剂盒 检测范围
zkP312Hu 长寿保证同源物2(LASS2)检测试剂盒 检测范围
zkK170Hu C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(C1QTNF1)检测试剂盒 检测范围
zkA218Hu 转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒 检测范围
zkA812Hu 胰淀素(IAPP)检测试剂盒 检测范围
zkC948Hu 甲酰肽受体1(FPR1)检测试剂盒 检测范围
zkB920Hu 趋化因子C-C-基元受体4(CCR4)检测试剂盒 检测范围
zkD004Hu 异亮氨酰tRNA合成酶(IARS)检测试剂盒 检测范围
zkE600Hu 泛素结合酶E2C结合蛋白E2I(UBE2I)检测试剂盒 检测范围
zkF883Hu S-期激酶关联蛋白1(SKP1)检测试剂盒 检测范围
zkH195Hu A类清道夫受体5(SCARA5)检测试剂盒 检测范围
zkG725Hu G蛋白偶联受体35(GPR35)检测试剂盒 检测范围
zkJ818Hu 含非POU域八聚体结合蛋白(NONO)检测试剂盒 检测范围
zkA241Hu WAP四二硫化物核心域蛋白2(WFDC2)检测试剂盒 检测范围
AEA465Hu 抗精子抗体(AsAb)检测试剂盒 检测范围
zkE256Hu 前胶原赖氨酸-1,2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD1)检测试剂盒 检测范围
zkG653Hu RNA结合基元蛋白3(RBM3)检测试剂盒 检测范围
zkG522Hu 受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)检测试剂盒 检测范围
zkJ258Hu δ样蛋白1(δLL1)检测试剂盒 检测范围
zkJ257Hu δ样蛋白3(δLL3)检测试剂盒 检测范围
zkP729Hu Rh血型D抗原(RHD)检测试剂盒 检测范围
zkQ185Hu 耦合因子6(CF6)检测试剂盒 检测范围
zkB783Hu 连接附着分子2(JAM2)检测试剂盒 检测范围
zkA395Hu 抑制素A(INHA)检测试剂盒 检测范围
zkL636Hu Jagged 2蛋白(JAG2)检测试剂盒 检测范围
zkJ352Hu 氨甲酰磷酸合酶1(CPS1)检测试剂盒 检测范围
zkC296Hu 血管抑素结合蛋白(AMOT)检测试剂盒 检测范围