Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5)

Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor 647 Conjugate)提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor 647 Conjugate)加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor 647 Conjugate)用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor 647 Conjugate)一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor 647 Conjugate)其它相关产品展示：zk-E11834 小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11835 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11836 小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11837 小鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11838 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11839 小鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11840 小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11841 小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11842 小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11843 小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11844 小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11845 小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11846 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11847 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11848 小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11849 小鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11850 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11851 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11852 小鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11853 小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11854 小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11855 小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11856 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11857 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11858 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11859 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11860 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11861 小鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11862 小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11863 小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11864 小鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11865 小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E11866 小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒 检测范围