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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 库存:
88
- 英文名:
GT1-1细胞
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 细胞形态:
液体
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
GT1-1 小鼠垂体瘤细胞
| 一、细胞基本属性 | ||||
| 细胞名称 | GT1-1 小鼠垂体瘤细胞 | |||
| 细胞别称 | GT1-1 ;小鼠垂体瘤细胞 | |||
| 种属来源 | 小鼠 | |||
| 组织来源 | 垂体瘤 | |||
| 生长特性 | 贴壁生长 | |||
| 细胞形态 | 上皮细胞样 | |||
| 细胞介绍 | GT1-1为GT1细胞系的亚克隆,GT1来源于稳定表达SV40大T抗原的转基因小鼠产生的可以分泌促性腺激素释放激素LHRH的肿瘤。GT1-1细胞可以表达pro-LHRHmRNA,并向培养基中分泌LHRH样的免疫反应性的物质。 | |||
| 细胞代数 | 10代以内 | |||
| 细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 | |||
| 支原体检测 | 无 | |||
| 培养基 | DMEM/F12+5%FBS+5%马血清+1%PS | |||
| 培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | |||
| 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
| 细胞货期 | 2周左右 | |||
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品 说 明 书 为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
c、弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
d、待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
c、用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
d、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞 说 明 书 ,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照 说 明 书 细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品 说 明 书 为准,网站 说 明 书 仅供参考。
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文献和实验受体细胞株(B类)DU145 人前列腺癌细胞G-401 人肾癌WilmsGLC-82 人肺腺癌细胞GT1.1 人垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)HCT116 人结直肠癌HCT-8 人结肠腺癌HEC-1B 人子宫内膜癌细胞Hela 人宫颈癌细胞Hep G2 人肝癌细胞Hep-2 人喉癌细胞HL-60 人白血病细胞HOS 人骨肉瘤细胞HT-1080 人纤维肉瘤HT-29 人结肠腺癌细胞HuTu-80 人十二脂肠腺癌JEG-3 人绒癌细胞JEG-3/VP16 人绒癌
性不是首先考虑的,这与自噬的应急特性是相适应的。 6)自噬的保守性:由于自噬有利于细胞的存活,因此无论是物种间、还是各细胞类型之间(包括肿瘤细胞),自噬都普遍被保留下来(谁不喜欢留一手呢?)。 参考综述: Autophagy fights disease through cellular self-digestion.pdf http://www.namipan.com/d/4c78fe31cb24080cd7630639c121cd71b24c9b56fbdf
三明治没夹紧,转膜后拿出来一看,marker都变得七扭八歪。但是有前辈说垫的海绵太厚可能将胶压断,没经历过,不知道是不是会有这种情况。 蛋白来源:肿瘤细胞 蛋白名称(可保密):磷酸化蛋白 蛋白分子量:10-200 KDa WB用膜类型、孔径
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