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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 英文名:
Recombinant General Transcription Factor IIIA (GTF3A)
- 供应商:
上海再康
- 保存条件:
-20℃
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | zk-D910Hu01 |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 90% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 37.7kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Val71~Gly365 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in 20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% sarcosyl, 5% trehalose, and preservative. |
VCDYEGCGKA FIRDYHLSRH ILTHTGEKPF VCAANGCDQK FNTKSNLKKH FERKHENQQK QYICSFEDCK KTFKKHQQLK IHQCQHTNEP LFKCTQEGCG KHFASPSKLK RHAKAHEGYV CQKGCSFVAK TWTELLKHVR ETHKEEILCE VCRKTFKRKD YLKQHMKTHA PERDVCRCPR EGCGRTYTTV FNLQSHILSF HEESRPFVCE HAGCGKTFAM KQSLTRHAVV HDPDKKKMKL KVKKSREKRS LASHLSGYIP PKRKQGQGLS LCQNGESPNC VEDKMLSTVA VLTLG
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验,建议先从降温和缩短表达时间等防降解的通用方法上考虑优化,当然这种情况是确定降解发生在表达阶段。如果两者之间有其他的序列,也可以考虑改造这段序列上入手。总之,「后浪」的小师弟、小师妹们提出各种各样的问题,核心目的就是解决重组蛋白表达过程中出现的各种异常,希望能够用更好的方式解决问题,获得高质量的重组蛋白。
因为短的肽标签对目标蛋白的结构影响最小,而大的亲和标签可能限制重组蛋白的折叠,影响蛋白质的生物学功能。(2)亲和标签对蛋白质稳定性的影响,亲和标签的加入是否会影响到目标蛋白的正确折叠,是促进目标蛋白的可溶性,还是容易形成包涵体,会不会造成氨基酸C和N端破坏,使目的蛋白表达不完全。(3)亲和标签所融合的位置,亲和标签可以加在N端,可以加在C端,也进行串联。多数情况下蛋白质的N端区域对蛋白质的功能不是太重要,所以在N端进行融合标签的融合常常能保留蛋白质的生物学功能。由于N端DNA序列对蛋白质的转录
无需抗体、跨物种通用:三篇高水平论文实证DAP-seq如何助力植物转录调控?
表达带有亲和标签(如Halo-tag)的转录因子蛋白。 基因组捕获:提取物种基因组DNA,打断后构建DNA文库。 亲和纯化:将表达的重组蛋白与基因组DNA文库孵育,利用亲和磁珠捕获蛋白结合的DNA片段。 高通量测序:洗脱结合DNA,进行高通量测序,通过生物信息学分析鉴定全基因组结合位点。 核心优势: 传统ChIP-seq DAP-seq 需要特异性抗体 无需抗体,通用亲和标签 需要稳定转基因植株 无需转基因,体外操作 物种依赖性强 适用于任何有参考
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