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- 2025年11月20日
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上海再康
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常温，避光
以下的操作步骤是最初由Byum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液；这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM（室温）于15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。猫内皮细胞无血清培养基不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟，离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中，室温离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 - 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞，用适当的培养基重悬细胞。
猫内皮细胞无血清培养基方法概述：
分离混合血液白细胞早期的方法，总是伴随红细胞聚集，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞密度增加聚集，同时可以从离心管上部收集白细胞。
Byum提出了一种更方便，通过使用Ficoll 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll甲泛影钠溶液中分层，低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞，和单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力，修订了Byum方法，MP生物医学公司生产的LSM，方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
猫内皮细胞无血清培养基相关产品如下：zk11216 人T淋巴瘤细胞系 Hut-102细胞
zk11217 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系 Jurkat77细胞
zk11218 人SV40转染成骨细胞,hFOB 1.19细胞
zk11219 人SV－40转化肺成纤维细胞, WI－38AV13细胞
zk11220 人Ph+急淋白血病细胞系 SUP-B15细胞,
zk11221 人LOVO结肠癌细胞,LOVO细胞
zk11222 人Hela细胞耐药亚株(Hela/DDP) Hela细胞
zk11223 人EB病毒转化的B细胞,CGM1细胞
zk11224 人EBV阳性B淋巴瘤细胞,P3HR1细胞
zk11225 人B细胞淋巴瘤细胞系 BJAB细胞
zk11226 人B淋巴细胞瘤细胞,Romas细胞
zk11227 人B淋巴细胞瘤细胞,RAMOS(RA.1)细胞
zk11228 人B淋巴细胞急性白血病细胞,BALL-1细胞
zk11229 人B淋巴细胞,Ramos（RA1细胞
zk11230 人B淋巴瘤细胞,Farage细胞
zk11231 人Burkitts淋巴瘤细胞系 CA46细胞
zk11232 人Burkitt's淋巴瘤细胞,Raji细胞
zk11233 人Burkitt's淋巴瘤细胞,Daudi细胞,
zk11234 人Burkitt`s淋巴瘤细胞,NAMALWA细胞
zk11235 人B 淋巴母细胞,HMy2.CIR细胞
zk11236 人APP基因转染CHO细胞株 7WD10细胞
zk11237 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293) APP-PS1细胞
zk11238 人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株 7WML6.0细胞
zk11239 人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株 7WCY1.0细胞
zk11240 热带念珠菌
zk11241 热带假丝酵母
zk11242 缺陷短波单胞菌
zk11243 球型芽孢杆菌
zk11244 球毛壳霉
zk11245 清酒酵母
zk11246 青春双歧杆菌
zk11247 浅灰链霉菌杭州变种
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文献和实验相关专题 经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养 领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。 无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求
无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求，但对有些实验却不适合，如观察一种生长因子对某种细胞的作用，这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子；又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质（抗体、生长因子）的能力；或者要大规模的培养某种细胞，以获得它们的分泌产物。因此研制出无血清培养基
无血清培养基(serum free medium, SFM)：是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清，称为无血清细胞培养基。无血清培养基的基本配方是基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。大多数的无血清培养基含有必须的向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如纤连蛋白、球蛋白、细胞生长因子等。无血清培养基被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体、病毒抗原、重组
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