- ￥420
- 再康生物
- ZK-0005080
- 中国
- 2025年11月20日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
LB01 solution
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100ml
中文名:LB01溶液（无菌）
英文名:LB01 solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20℃
产品简介植物的核DNA含量和倍性水平是植物学研究中重要的基础研究指标。流式细胞术的应用，提高了植物核DNA含量检测的准确度和检测速度。
只通过物理方法即切碎叶片往往不能获取大量完整的细胞核，还需加入特定的解离液，使植物细胞破碎，分散细胞器，进而解离出细胞核。同时解离液还可以防止细胞间相互粘连，抵消次生代谢物带来的消极影响，并维持一定的渗透压，保证细胞核的完整性。
产品说明：（使用举例）
Otto两步法：
1. 分别取内标植物和黄芩叶片约1cm2放到培养皿中，加入4℃保存备用的OttoⅠ提取液1mL，用锋利的单刃刀片垂直快速切碎叶片；
2. 混匀后用枪头吸取提取液经30um的滤头过滤到1.5mL的离心管中，4℃、1000g离心5min，小心吸弃上清；
3. 加入500uL Otto II溶液（临用前加入0.02mg/mL RNase A+0.02mg/mL PI）备用。
LB01一步法（其他解离液参照此解离步骤）：
1. 同两步法取材后，加入分装解冻后的LB01提取液1mL，快速切碎和过滤得细胞核悬液；
2.在上机测试前约5min，每管加入20uL的RNase储存液（1mg/mL）和20uL的PI储存液（1mg/mL）。
注意：上述操作中，刀片要锋利，材料要浸入提取液，垂直快速切碎，解冻的PI和加入PI的细胞核悬液，均需要冰上低温避光保存，每个样品需要3个重复。
荧光染料选择：
Hoechst 33342，Hoechst 33258和DAPI属于非嵌入式染料，主要结合在DNA的A-T碱基区，因此此类染料不适合于检测基因组绝对值，实际测量值偏小。但是可以获得高分辨率的柱状图，可以用于倍性水平检测。
PI，EB，AO为嵌入式染料，在检测核DNA的含量前，需要先降解RNA，排除双链RNA的干扰，此类染料只能染死细胞，也可以用来区分活死细胞。
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文献和实验商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌，但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作，避免污染。请始终使用适当的灭菌方法（如高压灭菌器、除菌过滤器）对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免
一、环境和液流的消毒 1、准备足量的无菌1×PBS（3L左右）和去离子水（10L左右）。PBS和去离子水可高压灭菌，sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75％ 医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次，然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、房间在分选前紫外灯照射15－20分钟；用1:50新洁尔灭拖地；用75％ 医用酒精擦拭工作台和收集架；用75％ 医用酒精喷洒分选细胞收集区和上样区。 二、开机和管道的消毒 1、将Sheath液换为活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液（不要
小鼠脾脏单细胞悬液制备流程 a)研磨法 小鼠颈椎脱臼处死，置于75%酒精浸泡5 min后，取出小鼠，置于无菌操作台上，左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露出脾脏。用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏，并浸泡于干净的PBS溶液中。 将脾脏置于200目筛网中，用组织研磨棒轻轻研磨至没有明显红色块状物。 用15 mL PBS冲洗筛网，并将冲洗液收集于15 mL离心管，300 g离心5 min，弃上清
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