8×10胶片

Western 实验步骤

梯度（两个孔）取其平均值减去空白后制作标准曲线得到曲线公式。测得的样品的 OD 值（三个孔）取其平均值按标准曲线的公式运算得到蛋白浓度，按 50 μg/上样孔的标准来计算上样量，算法为：上样量= 50/蛋白浓度。注：所有得到的 OD 值必须减去背景（标曲中空白孔的 OD 值）后再计算。 样品处理： 蛋白样品：5×SDS 上样缓冲液按照 4：1 比例混合沸水浴 10 min 左右。浓度过高的样品可用 PBS 稀释后再煮样。样品煮好后 -20 ℃ 保存待用（可保存半年），样品长期保存须置于 -70

X 光成像的概念与优势

X射线（X-ray），又被称为伦琴射线或 X 光，是一种波长范围在 0.01 nm 到 10 nm 之间（对应频率范围 30 PHz到 30 EHz）肉眼不可见的电磁辐射。X 射线之所以能使实验动物在荧屏或胶片上形成影像，一方面是基于 X 射线的穿透性、荧光效应和摄影效应；另一方面是基于实验动物组织有密度和厚度的差别。由于存在这种差别，当 X 射线透过实验动物各种不同组织结构时，它被吸收的程度不同，所以到达荧屏或胶片上的 X 射线量即有差异。这样，在荧屏或X射线上就形成黑白对比不同的影像

操作篇：western blot 之发光鉴定

Marker，进行分析与扫描。 2．AP-NBT/BICP 显色法： 每片 NBT/BICP 可溶解于 30 ml 水中，使用前将一片分装在 30 个 EP 管中，每张 3×9 cm 的膜取一管配成 1 ml 即可。将 PBST 或 TTBS 洗涤过的膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于 NBT/BICP 溶液液滴上，并用不透明物体（如报纸）遮挡光线，显色 20 s 后每 10 s 观察一次，至条带明显或有本底出现时将膜揭起置去离子水中漂洗后放滤纸上晾干即可观察与扫描。