Tie2 (AB33) Mouse mAb

Tie2 (AB33) Mouse mAb提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，Tie2 (AB33) Mouse mAb加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. Tie2 (AB33) Mouse mAb用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，Tie2 (AB33) Mouse mAb一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
Tie2 (AB33) Mouse mAb其它相关产品展示：zk-3213R Phospho-HER2(Tyr1112)磷酸化HER2受体抗体
zk-2809R HDAC4组蛋白去乙酰化酶4抗体
zk-3212R Phospho-HER2 (Tyr1221 + Tyr1222)磷酸化HER2受体抗体
zk-3127R phospho-HDAC8 (Ser39)磷酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体
zk-1198R HLA-DRHLA-DR抗体
zk-0752R HLA G人类白细胞抗原G抗体
zk-0556R HMGA2高迁移率族蛋白A2抗体
zk-0664R HMGB1高迁移率族蛋白B1抗体
zk-1238R HO-2血红素氧合酶2抗体
zk-0394R HOXc8HOXc8抗体
zk-1071R HRAS原癌基因H-ras抗体
zk-0191R HSP60热休克蛋白-60抗体
zk-0126R HSP70热休克蛋白-70抗体
zk-0696R HSP90 alpha热休克蛋白90α抗体
zk-0135R HSP90 beta热休克蛋白90β/HSP90 β 抗体
zk-0896R HCMV UL23人巨细胞病毒UL23抗体
zk-9702R HECAHECA蛋白抗体
zk-9091R hnRNP A2B1异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体
zk-9092R hnRNP U异质核糖核蛋白U抗体
zk-1719R HPV16 E6 + HPV18 E6人类乳头状瘤病毒16/18 E6抗体
zk-0843R HA tagHA tag标签抗体
zk-0455R HSL/LIPE荷尔蒙敏感脂肪酶抗体
zk-0847R HBA1血红蛋白α1/α-Globin抗体
zk-6353R HIPK2Fas相互作用蛋白激酶2抗体
zk-6777R HIPK3Fas相互作用蛋白激酶3抗体
zk-0860R HHV8 ORF50人类疱疹病毒8抗体
zk-3180R Phospho-HSP27 (Ser82)磷酸化热休克蛋白27抗体
zk-0870R HHV8/ORF K2人类疱疹病毒8抗体
zk-0859R HHV8 ORF50人类疱疹病毒8抗体
zk-9460R HEXIM1雌激素下调基因1蛋白抗体
zk-9461R HEY2转录因子HEY2蛋白抗体
zk-9462R LAGY肺癌相关蛋白Y抗体
zk-9459R HAND1心脏和神经嵴衍生蛋白1抗体
zk-9455R Hexokinase II己糖激酶2抗体
zk-0889R HSP90 alpha热休克蛋白90α/HSP90 α抗体