Illumina 平台专用 NGSBIO 文库定量试剂盒Se

概述

NGSBIO 文库定量试剂盒包含了对为Illumina NGS系统制备的文库进行精准、灵敏定量所需的所有组分。该试剂盒采用qPCR方法特异性定量连接了接头的DNA分子，从而确保获得最佳簇密度，以改进测序效率和数据质量。​

NGSBIO 文库定量试剂盒提供了一种可靠的基于qPCR的方法，用于定量为Illumina NGS系统制备的文库。该试剂盒包含5个DNA标准品、特异性针对Illumina P5和P7接头序列的引物以及qPCRBIO SyGreen® Mix预混液。先进的qPCR缓冲液系统采用高通量智能筛选技术开发，确保能高效扩增所有文库，包括那些GC或AT含量偏高的文库。试剂盒还提供便捷的文库稀释缓冲液。该试剂盒也可与VeriFi™ 文库扩增预混液配合使用。

​特点​

1. 可见的蓝色预混液，有助于提高加样精确度和准确性

2. 使用qPCR在测序前快速、准确地定量文库

3. 对多种样品类型、浓度、片段大小和GC含量的文库均能提供一致的定量结果

4. 对所有文库使用单一延伸时间

5. 适用于手动和自动化工作流程

6. 特异性定量仅可用于NGS测序的DNA分子

7. 采用抗体介导的热启动技术，确保所有反应同步开始

8. 兼容所有Illumina测序仪和qPCR平台

9. 提供可见的蓝色qPCR预混液版本

10. 使用在线NGSBIO文库定量工具轻松计算文库浓度

通用型试剂盒​

NGSBIO 文库定量试剂盒兼容所有qPCR平台，并经过优化，可在多种样品类型、片段大小（高达1000bp）、浓度和GC含量范围内提供一致且可重复的文库定量结果。使用我们的qPCR选择工具查找适合您仪器的ROX变体。

为方便准确地进行数据分析，我们推荐使用NGSBIO文库定量工具。

​精准的文库定量​

qPCR被认为是定量NGS文库的最佳方法，因为它只测量那些可作为文库扩增和簇生成模板的接头连接分子。NGSBIO 文库定量试剂盒能够实现高度精准的定量，这对于获得最佳簇密度和更高测序效率至关重要。

文库定量可在接头连接后的任何时间进行，并且应在簇生成之前使用。为方便准确地进行数据分析，我们推荐使用NGSBIO文库定量工具。高估文库浓度可能导致簇密度不足，而低估文库浓度则可能导致簇密度过高达到饱和。要了解有关最佳簇密度的更多信息，请参阅您Illumina测序仪的操作说明。

​使用NGSBIO Illumina平台文库定量试剂盒与竞争对手试剂盒（NEB, KAPA）及Qubit荧光计获得的NGS文库定量值对比分析图​

• ​高一致性和重复性：​​ 使用NGSBIO文库定量试剂盒（紫色）、NEBNext®文库定量试剂盒（橙色）和KAPA文库定量试剂盒（绿色）对16个接头连接文库进行定量。NGSBIO文库定量试剂盒显示重复样品的变异更小，一致性更高。定量结果与两个领先的NGS文库定量试剂盒制造商的产品结果相当。每个图表右下角的数字代表使用Invitrogen的Qubit荧光计测得的dsDNA浓度。

使用NGSBIO Illumina平台文库定量试剂盒生成的扩增曲线和标准曲线图​

• ​扩增曲线和标准曲线：​​ 将一个接头连接文库样品（紫色）与NGSBIO文库定量试剂盒提供的六个标准品模板（灰色）同时运行（图a）。将扩增曲线的Ct值对标准品模板浓度的对数作图。通过标准品点拟合一条线性曲线（图b）。然后根据未知样品在曲线上的位置计算其浓度。

宽动态范围​

试剂盒提供的DNA标准品经过精确定量，即开即用，覆盖5个数量级（从2 pM 到 0.2 fM）。该试剂盒适用于甚至低浓度文库的定量，包括无需PCR扩增步骤构建的文库。