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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
0
- 英文名:
Fura-2, AM *UltraPure Grade*
- CAS号:
108964-32-5
- 保质期:
12个月
- 供应商:
西安百萤
- 保存条件:
-15℃以下,避光防潮
产品介绍
Fura-2 AM 是一种细胞可渗透的比率法钙离子荧光指示剂,在紫外光激发下发出绿色荧光。
Fura-2 AM 是 Fura-2 的膜渗透性形式。它属于比率法钙离子指示剂类别,该类指示剂还包括 Indo-1 等荧光染料。这些探针通过观察螯合钙时荧光团在两个波长的变化,并计算这两个测量点的比值来实现钙的定量。这与强度计量型探针(如 Fluo-4)仅利用单一光谱值形成对比。
原理与机制
当结合钙离子后,Fura-2 在 300 至 400 nm波长范围内的吸光度会发生位移:未结合钙的染料其最大激发波长为 380 nm,而结合钙的染料其最大激发波长为 340 nm。通过扫描激发光谱并监测 510 nm处的发射光,可以测量这种吸光度的变化。计算得到的 340/380 nm比值与细胞内钙离子浓度成正比。
工作液配制
Fura-2 AM工作液
实验当天,将Fura-2 AM溶解于DMSO或解冻储备液至室温。
选用合适缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液),加入0.04% Pluronic® F-127,配制2至20 µM的Fura-2 AM工作液。对多数细胞系,推荐终浓度为4-5 μM。具体染料负载浓度需通过实验优化。
注意:1.非离子型表面活性剂Pluronic® F-127可增强Fura-2 AM水溶性,AAT Bioquest提供多种Pluronic® F-127溶液。
2.若细胞存在有机阴离子转运体,可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒(孔板内终浓度0.5-1 mM)以减少去酯化染料的渗漏。AAT Bioquest提供多种ReadiUse™丙磺舒产品(包括水溶型、钠盐及稳定化溶液)。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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