N-丁基荧光素 CAS号：335193-91-4

荧光标记怎么选择？

荧光蛋白和荧光素酶是在基因工程中广泛使用的两类报告基因 (reporter gene)，是研究生物分子或细胞活动规律及本质的重要工具。 荧光蛋白 荧光蛋白能被一定波长的光激发，电子被激发到高能级，随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光。绿色荧光蛋白（GFP）最初是在水母中发现的，随后各种颜色的荧光蛋白被开发出来。目前荧光蛋白按照颜色分类主要分为绿色系、红色系、蓝色系、青色系、黄色系和橙色系（表 1）。这么多的荧光蛋白，可以根据哪些方面来选择呢？ 激发峰/发射峰：每种荧

荧光素FITC标记抗体的方法

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark

荧光定量图像分析

维坐标形式等，将生物样品的平均荧光强度、背景荧光强度、面积、周长和形状因子像素点等显示出来，同时在一种方式中表达。 我国学者为了解肝病患者肝组织纤维化程度，应用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光定量图像分析。他们先把经肝穿刺活检得到的肝组织实施免疫荧光组织化学染色，肝组织I、Ⅲ型胶原分别与荧光素标记抗体结合，被标记上荧光素。不同的荧光素被共聚焦显微镜中激光管激发后，荧光强度和荧光面积的变化可以被计算机分析，便能准确地量化肝组织纤维化程度。首先，使用激光共聚焦显微镜检测I、Ⅲ型胶原的荧