Clara® 抗抑制探针法预混液及一步法预混液 Hi-Ro

​产品概述​

Clara® 抑制剂耐受性探针法预混液和一步法预混液是广谱抑制剂耐受性的 4× 预混液，分别用于探针法 qPCR 和一步法 RT-qPCR。即使存在 PCR 抑制剂，使用 Clara® 抑制剂耐受性探针法预混液也能实现尖端的 DNA 和 RNA 检测。这些广谱、抑制剂耐受性的 qPCR 预混液经过专业设计，能够克服来自实验室、环境和临床样本中的各种挑战性抑制剂，确保 DNA 检测结果可靠并简化工作流程。对于希望扩增 RNA 的终端用户，我们推荐 Clara® 抑制剂耐受性探针法一步法预混液。

产品特点​

• ​广谱抑制剂耐受性：​​ 有效对抗多种PCR抑制剂。

• ​4× 浓缩配方：​​ 适合高通量和高度多重检测。

• ​优异的RNA/DNA检测能力：​​ 对RNA和DNA靶标均有高检测灵敏度。

• ​低模板定量可靠：​​ 可准确定量低丰度模板。

• ​抗体介导的热启动技术：​​ 提高反应特异性和灵敏度。

• ​广泛的仪器兼容性：​​ 兼容所有实时荧光PCR平台——标准和快速循环条件。

• ​支持超快循环：​​ 逆转录可短至3分钟，PCR变性1秒，退火/延伸3秒。

• ​一步法配方：​​ 包含修饰的 UltraScript® 逆转录酶和RNase抑制剂，单管操作。

​应用领域​

• 物种丰度定量

• 基因分型

• 等位基因鉴别

• 体外诊断试剂盒开发

• 单重及多重RNA/DNA检测

• 粗唾液样本qPCR

​图1. 使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液检测DNA靶标。​​

使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液，在探针法qPCR反应中扩增γ-肌动蛋白的系列稀释液。使用了四种模板稀释度，每个靶标设三个技术重复，反应体系为20 μL。循环条件为：95°C 3分钟；随后95°C 10秒，60°C 20秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液可成功扩增低至每反应0.25 pg/μL的cDNA靶标。

图2. 在有/无唾液情况下对DNA靶标进行四重检测。​​

使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液，在多重qPCR检测中扩增四个DNA靶标，比较存在人唾液（紫色）和不存在人唾液（蓝色）的情况。反应体系为20 μL，每个靶标/稀释度设三个技术重复。含唾液的反应中含有5 μL用通用转运培养基1/10稀释的唾液。循环条件为：95°C 3分钟；随后95°C 10秒，60°C 20秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液即使在存在人唾液的情况下，也能在多重检测设置中成功扩增DNA靶标。

​图3. 使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液进行五重RNA靶标检测。​​

使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，在多重一步法RT-qPCR反应中扩增五个RNA靶标。每个稀释度设三个技术重复，反应体系为20 μL。循环条件为：47°C 10分钟，95°C 2分钟；随后95°C 10秒，60°C 30秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液在五重一步法RT-qPCR反应设置中，于标准循环条件下显示出高灵敏度和效率。

图4. 在有/无唾液情况下对病毒RNA靶标进行四重检测。​​

使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，在多重一步法RT-qPCR反应中扩增四个RNA靶标，比较存在人唾液（紫色）和不存在人唾液（蓝色）的情况。每个靶标设四个模板稀释度，每个稀释度三个技术重复，反应体系为20 μL。含唾液的反应中含有5 μL用通用转运培养基1/10稀释的唾液。循环条件为：47°C 10分钟，95°C 2分钟；随后95°C 10秒，60°C 30秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液即使在存在人唾液的情况下，也能在多重检测设置中成功扩增RNA靶标。

​图5. Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液与竞品的比较。​​

在存在人唾液的条件下，使用四种不同的预混液（包括Clara®）对四个RNA靶标进行多重一步法RT-qPCR反应比较。反应条件同上。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液在存在人唾液的多重检测设置中，其性能匹配或优于三种竞品。

图6. Clara抑制剂耐受性化学在抑制剂存在下提供稳健性能。​​

使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，挑战递增浓度的各种临床、植物、环境和实验室化学抑制剂。根据未抑制的对照反应（100%活性）计算各抑制剂浓度存在下的活性百分比。PCR Biosystems的抑制剂耐受性化学在大多数测试抑制剂存在下均能提供稳健的qPCR性能。*纤维素在所用水性反应条件下不溶，以悬浮液形式加入。