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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 保存条件:
-20
- 规格:
10mg
重组蛋白A蛋白G融合蛋白
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
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FrdE0017 |
r-PAG |
10mg |
1.产品简介:
重组蛋白A蛋白G融合蛋白(r-PAG)融合了8个抗体Fc结合区域,包含金 黄 色 葡萄球菌蛋白A的5个Fc结合域和链球菌蛋白G的3个Fc结合域,去除了蛋白A和蛋白G中细胞壁结合域、白蛋白结合域、非特异性结合域。与单独的蛋白A或蛋白G相比,具有更宽广的结合范围,可以与人的所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM结合,但不能与小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白结合,适合用于鼠IgG单抗的提取和检测。同时融合后的r-PAG降低对pH的依赖,允许在pH5-8进行结合。
2.分子量:
约56.3KD
3.表达宿主:
大肠杆菌
4.纯度:> 90%
5.生物活性:
≥800 U/mg蛋白
6.内毒素:
<0.01EU/ug
7.使用说明:
建议分装使用,避免反复冻融,若稀释,用生理盐水、培养基或 PBS 稀释,稀释后浓度保持在 50ug/mL 以上。
8.注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
*本试剂仅供实验室研究使用
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文献和实验「铲屎官」注意了!剑桥大学揭示这些基因的改变或让猫猫狗狗成为
细胞 iBMDM 和犬的巨噬样细胞 DH82。结果表明小鼠巨噬细胞感染 2 小时后开始裂解,而犬的巨噬样细胞经过 12 小时仍存活,表明犬的细胞对于鼠伤寒沙门菌的耐受性更高。接着,研究者在小鼠模型上通过 CRISPR-Cas9 技术构建了与 caspase-1/-4 融合蛋白催化作用相当的重组蛋白。小鼠细胞在脂多糖(LPS)刺激下很快裂解,而犬的巨噬样细胞对于 LPS 的刺激则无反应。进一步的体外实验表明,caspase-1/-4 融合蛋白能激活 IL-1β 并且同时切割消皮素 D。图片来源:Cell
用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标
。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解
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