无外泌体血清

无外泌体血清

无外泌体血清是一种经特殊处理、降低了外泌体含量的血清产品，主要用于外泌体相关研究及对背景信号要求严苛的细胞培养。以下是其详细介绍：
定义与用途：无外泌体血清是从胎牛血清等常规血清出发，经特定处理去除其中所含外泌体的血清制品。常规血清含有的牛外泌体会对实验中外泌体的研究、检测带来干扰，无外泌体血清则主要用于外泌体研究，可避免血清中外源外泌体对实验结果的干扰，也适用于需要收获目标细胞分泌外泌体的细胞体外增殖培养。
制备方法超速离心法：利用外泌体密度一般在 1.13-1.19g/mL 的特点，通过 100000g 左右的超高速离心，使外泌体沉淀与血清其他成分分离，是常用的制备方法。
超滤法：选用特定孔径的超滤膜，截留外泌体等大颗粒，让血清中的小分子物质和水分通过，达到去除外泌体的目的。
试剂盒法：采用试剂盒中的特异性试剂与外泌体结合，或通过特定分离介质，将外泌体从血清中分离出来。
密度梯度离心法：使用蔗糖、碘克沙醇等构建密度梯度介质，血清中外泌体与其他成分在离心力下依密度不同分布于不同条带，进而分离外泌体。
主要特点外泌体去除率高：一般采用超速离心处理的产品，外泌体去除率可达 97% - 99% 以上，能有效降低外源性背景信号干扰。

维持细胞培养功能：制备工艺通常不会严重破坏血清中其他营养成分，处理后的血清对细胞的生长速率、形态维持和增殖能力等与普通血清无显著差异，可支持肿瘤细胞、原代细胞、免疫细胞及多种干细胞的培养。
低杂质含量：无外泌体血清通常也会控制内毒素、血红蛋白等杂质水平，一般内毒素含量较低，血红蛋白含量也常处于低水平状态，适合对环境敏感细胞的培养。
严格质量把控：通常会经历多重无菌过滤，如三次 0.1μm 过滤等，也会经过细菌、支原体、病毒等污染检测以及多项理化指标检测，以确保批次稳定性。
使用注意事项解冻方式：通常需从 - 20℃或 - 80℃取出，放在 4℃冰箱解冻约 1 天，解冻时每隔 2 小时左右轻轻摇晃，使温度与成分均一，减少沉淀产生，不可直接使用 37℃水浴快速解冻。
血清更换：更换无外泌体血清时，建议按 1:1-1:4 的比例逐步替换，让细胞适应新的培养环境。
分装保存：若无法短期内用完，解冻后需要适当分装，分装瓶需预留空间，防止冻裂，-20℃可长期保存，4℃通常仅能保存 1 周左右。