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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
10
- 英文名:
Seebio® 1st Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
西宝生物400-021-8158
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100T/500T/2000T
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥998.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥3992.0 |
| 规格: | 2000T | 产品价格: | ¥12775.0 |
产品介绍
【基本信息用途】
本产品是使用Seebio® Reverse Transcriptase,以总RNA或m RNA为模板合成1st Strand cDNA的试剂盒,含有所需的全部试剂。Seebio® Reverse Transcriptase,是一种大肠杆菌重组表达的改进型鼠白血病逆转录酶,具有高温反应、优越的持续合成能力和强的杂质耐受能力,逆转录温度可提高至50~55℃,避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制。可提供更高的全长cDNA产量。合成的1st Strand cDNA可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR、qPCR 反应等。
【试剂盒组成】
| 组分 | 含量 |
| Seebio® Reverse Transcriptase(200U/μl) | 50μl |
| Seebio® dNTP Mixture (10mM each) | 50μl |
| 5×Seebio® Buffer | 200μl |
| RNase Inhibitor(40U/μl) | 25μl |
| Oligo dT Primer(50μM) | 50μl |
| Random Primers N6(50μM) | 100μl |
| RNase-free H2O | 1ml |
【特点和优势】
(1)逆转录效率高、产量优异:Seebio® Reverse Transcriptase缺失了RNA酶H活性,具有更强的延伸能力和稳定性,具有更好的逆转录效率,可提供较普通逆转录酶更高的全长cDNA产量;
(2)耐热性及稳定性强:逆转录酶耐受高温的能力是cDNA合成的重要影响因素,Seebio® Reverse Transcriptase在50-55℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期;
(3)杂质耐受度强:对常见杂质(乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸)均具有强的耐受度。
【用途】
以mRNA或者总RNA为模板,合成第一链cDNA:
1、RNA的逆转录,cDNA的克隆、基因表达
2、设备制造商配套检测用试剂,如数字PCR仪、荧光定量PCR仪
【使用建议】
1.需准备的主要试剂和仪器
恒温水浴锅、琼脂糖凝胶、电泳仪、离心机、移液器和枪头等。注意操作过程应RNase-Free。
2.1st strand cDNA 合成反应
(1)按下表配制反应液
| 试剂 | 使用量 |
| Oligo dT Primer(50μM)或 Random Primers N6(50μM | 1μl |
| Seebio® dNTP Mixture (10mM) | 1μl |
| 5×Seebio® Buffer | 4μl |
| RNase Inhibitor(40U/μl | 0.5μl |
| Seebio® Reverse Transcriptase | 1μl |
| RNA 模板 | 总RNA<5μg mRNA<1μg |
| RNase-free H2O | Up to 20 μl |
(2)缓慢混匀后,进行逆转录反应:30℃10 min, 50℃30-60 min。
(3)反应结束后,95℃保温5 min使酶失活,-20℃保存。长片段cDNA合成时,70℃ 15 min失活处理可保障片段有更好的完整性。
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