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人禽流感H5N1(AIV-H5N1)ELISA检测试剂盒

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  • 2025年10月31日
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      上海晅科生物科技有限公司

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      100

    • 灵敏度

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    • 样本

      血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本

    • 标记物

      hrp辣根过氧化物酶

    • 适应物种

    • 应用

      科研

    • 检测方法

      夹心法

    • 检测范围

      详见产品手册

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥900.0
    规格:96T产品价格:¥1300.0
    产品名称:人禽流感H5N1(AIV-H5N1)ELISA检测试剂盒
    英文名称:AIV-H5N1
    简称:AIV-H5N1
    单位:ng/mL
    准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
    特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
    贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    有效期:6个月。

    使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中禽流感H5N1含量。

    实验原理:
    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被禽流感H5N1(AIV-H5N1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的禽流感H5N1(AIV-H5N1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    试剂盒组成:30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。

    样品收集、处理及保存方法:
    1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
    3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
    5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    自备物品:
    1.    酶标仪(450nm)
    2.    高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    3.    37℃恒温箱

    操作步骤:
    1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户在小试管中进行稀释。
    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样,待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
    4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
    7.温育:操作同 3。
    8.洗涤:操作同 5。
    9.显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
    10.终止:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

    操作注意事项:
    1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
    2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
    3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照产品手册操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
    4.  严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
    5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

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