- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM1062662
- 2025年10月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pLV3-CMV-EGFP-PLCdelta-PH-Puro
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pLV3-CMV-EGFP-PLCdelta-PH-Puro
货号：KM1062662
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞,慢病毒
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：
原核抗性：Amp
真核抗性：Puro
荧光标记：
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文献和实验：pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP（2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染，再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝，2 个转录起始位点，以及多个
(Klenow酶补平)和XbaI之间，构建重组质粒载体pGL3-EBVR。pGL3-EBVR经Bgl I1和BamH I双酶切得到SV40启动子和EBVR片段，插入pcDNA3-EGFP中CMV启动子上游BglI1位点处，构建重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR的构建 采用Hindin和EcoRI消化pCL，获得800 bp的人13-IFN基因上游IFN-MAR，将此片段克隆至pBluescript中，构建重组质粒载体pBlue
外源蛋白的表达水平及产量。此外甲醇酵母的表达载体都为E.coli/Pichia Pastoris的穿梭载体，其中含有E.coli复制起点和筛选标志，可在获得克隆后采用E.coli细胞大量扩增.目前，将质粒载体转入酵母菌的方法主要有原生质体转化法、电击法及氯化锂法等。甲醇酵母一般先在含甘油的培养基中生长。培养至高浓度。再以甲醇为碳源。诱导表达外源蛋白。这样可以大大提高表达产量。利用甲醇酵母表达外源性蛋白质其产量往往可达克级。与酿酒酵母相比其翻译后的加工更接近哺乳动物细胞，不会发生超糖
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