6-氯-4-甲基-5-氮杂吲哚;1352397-22-8;9

目的基因片段的PCR扩增与克隆

1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1）、PCR反应成分： TaqDNA聚合酶引物浓度：一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50－200μ

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

我是一个门外汉，刚刚做WB。做出来后全是模糊的片子，还有就是只有黑点，没有条带。一直没找到原因。恳请各位高人教导。并且按照以下的方法做。我做的是SD大鼠骨骼肌组织的蛋白检测，取300mg肌肉，最终加2.4ML裂解液。10000转离心10分钟。定蛋白也是按一下方法。上样按每10微升80微克蛋白上的样。用的是大连竞迈公司的垂直电泳仪。装模是半干法，按没分钟1KD转的。一抗1：1000.二抗1：6000。。 我测的蛋白在95KD左右，一半装2-2.5小时。但是结果不是背景强就是没东西。而且经常

高效液相色谱柱后衍生测定鸡组织中甲基盐霉素残留量

试剂公司）。 　　2�2 色谱分离条件 　　流动相：V(甲醇)∶V(乙酸)∶V(水)=94∶3∶3；流速： 0�8 mL/min；衍生液流速：0�4 mL/min；反应温度： 95 ℃；检测波长： 520 nm；进样量： 100 μL；柱温： 30 ℃。 　　2�3 样品处理 　　2�3�1 样品中甲基盐霉素的提取 　　称取组织样品(5�0±0�05）g于50 mL聚四氟乙烯离心管中，加入10 mL蒸馏水，以10000 r/min以上的速度均质60 s，再加入10 mL异辛烷