2-甲基-2-羟甲基氧杂环丁烷;61266-71-5;95%

目的基因片段的PCR扩增与克隆

1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1）、PCR反应成分： TaqDNA聚合酶引物浓度：一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50－200μ

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

我是一个门外汉，刚刚做WB。做出来后全是模糊的片子，还有就是只有黑点，没有条带。一直没找到原因。恳请各位高人教导。并且按照以下的方法做。我做的是SD大鼠骨骼肌组织的蛋白检测，取300mg肌肉，最终加2.4ML裂解液。10000转离心10分钟。定蛋白也是按一下方法。上样按每10微升80微克蛋白上的样。用的是大连竞迈公司的垂直电泳仪。装模是半干法，按没分钟1KD转的。一抗1：1000.二抗1：6000。。 我测的蛋白在95KD左右，一半装2-2.5小时。但是结果不是背景强就是没东西。而且经常

实验室常用实验生物试剂的配制大全

双蒸水，溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks液 使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO3调整PH值。 3.甲基红试剂 (1)成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95%乙醇 300ml (2)用途：测定甲基红反应