2-甲基-3,5-吡啶二甲酸;89942-70-1;96%;

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（下）

要设立对照。该法可用于多样本、多位点甲基化的检测，样本需要量少，适于临床样本，但存在假阳性问题。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析（methylation sensitive dot blotassay，MS-DBA） G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法，能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是：先用重亚硫酸盐处理待测DNA片段，随后以非CG区的引物行PCR扩增，将扩增产物变性后转移到尼龙膜上，用3'端DIG标记的含有2个CG（或TG）的双核苷酸探针与DNA

盘点 PCR 的七大应用领域

DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U）。重亚硫酸盐处理不会影响甲基化的胞嘧啶（m5C） 。为了检测甲基化位点，一对引物经设计带有鸟嘌呤（G），可与目标序列中的 m5C 配对；为了检测未甲基化位点，另一对引物带有腺嘌呤（A），可与重亚硫酸盐转化分子中的U配对（随后，与后续 PCR 循环中的胸腺嘧啶（T）配对）。通过引物配对得到的阳性 PCR 扩增结果可用于确定位点的甲基化状态（图 7）。 图 7.甲基化特异性 PCR 第一步，使用重亚硫酸盐处理 DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶转化

核酸碱基薄层层析及双波色谱扫描分析准确度验证

, C, T 和U，均为层析纯，含量>98多;A, U德国产，C为BDH产，G, T分别为上海东海制药厂和恒信化工厂产。小牛胸腺DNA为上海牛奶公司产。薄层层析 用硅胶H,为青岛海洋化工厂产。薄层层 析用纤维素(Cell ulo sepulverM N300UV254)，德国产。狡甲基纤维素钠为上海化学试剂厂产。 其他试剂为AR，水为重蒸水。 2.仪器日本岛律CS-910双波长色谱扫描仪。 (二)分析方法 1.薄层层析 分离(1)制板