8-METHYLQUINOLIN-5-AMINE;50358

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

我是一个门外汉，刚刚做WB。做出来后全是模糊的片子，还有就是只有黑点，没有条带。一直没找到原因。恳请各位高人教导。并且按照以下的方法做。我做的是SD大鼠骨骼肌组织的蛋白检测，取300mg肌肉，最终加2.4ML裂解液。10000转离心10分钟。定蛋白也是按一下方法。上样按每10微升80微克蛋白上的样。用的是大连竞迈公司的垂直电泳仪。装模是半干法，按没分钟1KD转的。一抗1：1000.二抗1：6000。。 我测的蛋白在95KD左右，一半装2-2.5小时。但是结果不是背景强就是没东西。而且经常

多肽的基本常识

　　包装 1mg或更少的多肽按净重包装，声明的小瓶重不含相关抗离子和水。 例如，氨基酸分析决定的肽含量是80%， 在1mg样品中，那么瓶中毛重是1.25mg。 　　大量的多肽以毛重算。标出的重量含相关抗离子和水， 例如，25mg样品中肽百分比为90%，那么，实际肽量为25mg×90%=22.5mg 　　不要把肽含量和纯度搞混了。肽的纯度可能是100%， 而肽含量相关带电基团（如Arg, Lys ）的抗离子量和肽新水性决定。这是合成肽的本身特性。 冻干肽的保存 　　所有产品应

MACS(磁珠分选)技术相关产品 （dynal公司）

离得到纯度为99%、99%存活力和95%产量的靶细胞。Dynabeads immunomodifications免疫修饰反应技术由于Dynabeads的大小（4.5 μm）与细胞的大小相近，所以它能将模拟的体内刺激信号提呈给细胞。如Dynabeads CD3/CD28 T Cell Expander可同时通过CD3抗原呈递一个刺激信号和通过CD28抗原呈递一个共刺激信号给T细胞，促进T细胞克隆增殖。六、Dynabeads 细胞分离法该方法是利用包被在Dynabeads表面的抗体与特异