3，5-二氯苯磺酸新戊酯;934498-40-5;95%;V

PCR－RFLP分析技术

一、实验原理 聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温（约93℃~95℃）下使之变性解链；人工合成的两个寡核苷酸引物在低温（约50℃~70℃）下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合；引物在DNA聚合酶作用（约70℃~75℃）下沿模板按5’→3’方向延伸，合成目的DNA片段的新互补链。如此经过n个周期，理论上扩增2n倍，一般PCR经30~40周期后可获得百万

【转帖】聚合酶链式反应（PCR）

--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2-4 min，2-3 h就能将待扩增目的基因扩增放大几百万倍。 PCR扩增反应体系与PCR反应条件 参加PCR反应的物质主要有五种：引物、PCR扩增酶、dNTP模板和Mg2+。 PCR扩增引物 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 反应产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

一、目的： 学习聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的原理及方法。二、原理： 等电点聚焦（isoelectric focusing，IEF）或简称电聚（electrofocusing），也曾称等电点分离聚焦电泳等。它是60年代中期出现的技术，克服了一般电泳易扩散的缺点。近年来，等电点聚焦电泳又有了新的进展，可以分辨等电点只差0.001pH单位的生物分子。由于它的分辨力高、重复性好、样品容量大、操作简便、迅速，在生物化学、分类学、分子生物学及临床医学研究等诸方面，都得到广泛应用。等电