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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
17298-37-2
- 规格:
1mg
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文献和实验・2H2O,溶于双蒸水中定容至1升,置于4℃下可贮存2周,其pH约为8.3。 (5)TBE电极缓冲液:10×TBE 缓冲液稀释至1×TBE备用。 (6)TEMED (7)固定/停止溶液:10%冰醋酸(V/V)配制2升备用。 (8)染色溶液:硝酸银2克,甲醛3ml,溶于2升超纯水中备用。 (9)显影溶液:60克碳酸钠(Na2CO3)溶于2升超纯水中,使用前加3ml 37% 甲醛和 40ml硫代硫酸钠溶液(10mg/ml)。 (10)95%乙醇。 (11)0.5%冰乙酸
钠(Na2CO3)溶于2升超纯水中,使用前加3ml 37% 甲醛和 40ml硫代硫酸钠溶液(10mg/ml)。(10)95%乙醇。(11)0.5%冰乙酸。(12)Sigmacote (Sigma CAT. #SL-2)。五、操作步骤: 成功地使用银染测序系统需要对提供的操作方法进行仔细考虑。银染不如放射性检测法灵敏,而需要更多的模板量,此外,也不可能通过延长X-光胶片曝光时间的方法增加信号强度。因此,请使用推荐的DNA 模板量,每次均使用所提供的对照检查系统的可靠性,并且注意如下几点
操作步骤: (1)在0.5ml eppendorf 管中混合如下溶液: 单链模板(约0.5pmol) 1mg 适当引物5pmol 10×Klenow 缓冲液3ml 加水至20ml (2)将eppendorf 管加热到85℃ 5 分钟,在30 分钟内,使小离心管降到37℃; (3)依次加入: DTT 2ml [a-32P]dATP 5ml 未标记的dATP 1ml dGTP,dCTP,dTTP 混合液1ml 混合均匀后,稍离心使之沉于试管底部。
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