2-氯-4-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶;1227499-9

离子交换法从酶解液中提取阿魏酸

[摘要]以麦麸酶法降解液为原料，采用D201大孔树脂对阿魏酸进行分离提纯，探讨了上柱工艺条件和洗脱条件，确定最佳离子交换操作工艺：室温下，料液阿魏酸浓度在20OOmg／L-3000mg／L之间，pH值9．0，上柱流速1 mE／min，洗脱剂配比(V／V)为无水乙醇：水：盐酸=60：36：4，洗脱流速为1 ml／min。在该操作工艺条件下，阿魏酸收率达97％以上，且纯度大大提高。     阿魏酸(4-羟基-3-甲氧基肉桂酸，FA)是植物中普遍存在的一种酚酸，很少以游离态存在，多与低聚

聚合酶链式反应(PCR)扩增与扩增产物克隆

的Taq DNA聚合酶就足以进行30轮循环.所用的酶量可根据DNA、引物及其它因素的变化进行适当的增减.酶量过多会使产物非特异性增加,过少则使产量降低.反应结束后,如果需要利用这些产物进行下一步实验,需要预先灭活Taq DNA聚合酶, 灭活Taq DNA聚合酶的方法有：(1) PCR产物经酚:氯仿抽提,乙醇沉淀。 (2) 加入10mmol/L的EDTA螯合Mg2+ 。 (3) 99-100℃加热10min.目前已有直接纯化PCR产物的Kit可用。 　　6. 反应缓冲液：反应缓冲

PCR(聚合酶链式反应)扩增和扩增产物克隆

DNA 聚合酶的方法有：(1) PCR 产物经酚:氯仿抽提，乙醇沉淀。 (2) 加入10mmol/L的EDTA螯合Mg2+ 。 (3) 99-100℃加热10min。目前已有直接纯化PCR 产物的Kit可用。6、 反应缓冲液： 反应缓冲液一般含10-50mmol/L Tris·Cl (20℃下pH8。3-8。8)， 50mmol/L KCl和适当浓度的Mg2+ 。 Tris·Cl在20℃时pH为8.3-8.8，但在实际PCR 反应中，pH为6.8-7.8。 50mmol/L的KCl有利于引物的退火