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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT, 密封
- 英文名:
2-(3-(Benzyloxy)propyl)propane-1,3-diol
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
132970-27-5
- 规格:
100mg
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文献和实验亚硝基铁氰化钾 无水酒精 配制方法: (1)醋酸盐缓冲液:取1.0mol/L的HCl 190ml加入1.0mol/L的醋酸钠400ml中混合,再加蒸馏水稀释至1000ml,用醋酸或NaOH将pH调至3.3。 (2)A液:取上述缓冲液5ml,溶解100mg亚硝基铁氰化钾,加蒸馏水92.5ml混合。 (3)B液:称取5mg TMB加入2.5ml无水酒精中,可加热至37℃~40℃直到TMB完全溶解。 (4)孵育液:放入标本前数秒,取2.5ml B液及97.5ml A溶于试管中充分混合。(液体
至100-200mg/ml。 3、连接反应后,反应液在0℃储存数天,-80℃储存2 个月,但是在-20℃冰冻保存将会降低转化效率。 4、粘性末端形成的氢键在低温下更加稳定,所以尽管T4 DNA 连接酶的最适反应温度为37℃,在连接粘性末端时,反应温度以10-16℃为好,平齐末端则以15-20℃为好。 5、在连接反应中,如不对载体分子进行去5'磷酸基处理,便用过量的外源DNA 片段(2-5 倍),这将有助于减少载体的自身环化,增加外源DNA 和载体连接的机会。 6、麦康凯选择性琼脂组成
0.28g CaCl2(无水,分析纯),溶于50ml重蒸水中,定容至100ml,高压灭菌。 6.含15%甘油的0.05mol/L CaCl2: 称取0.28g CaCl2(无水,分析纯),溶于50ml重蒸水中,加入15ml甘油,定容至100ml,高压灭菌。第三节 操作步骤 一、 受体菌的培养 从LB平板上挑取新活化的E. coli DH5α单菌落,接种于3-5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,直至对数生长后期。将该菌悬液以1:100-1:50的比例接种于100ml LB
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