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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
SSAA09E1
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
433212-75-0
- 规格:
1ml
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文献和实验3.75ml 4M NaCl 3ml 10% Triton X (Tx-100) 300µl 10% NAD 21.45ml H20 ChIP wash buffer 30ml final volume: 150µl 2M Tris 1.7ml 4.4M LiCl 60µl 0.5M EDTA 1.5ml 10% NAD 1.5ml 10% NP-40 25.09ml
固定,用X-gal显色。每个蓝染的细胞代表一个载体转导单位(T.U.)。 载体基因组拷贝数用点印迹杂交分析来确定,如前所述方法测定A260(Fisher et al.,1996)。对于6孔盘的小规模包装实验,制备的原始载体用DNase I在37°C处理30分钟。DNase 在75°C灭活,蛋白质用50mM Tris 1mM EDTA 0.1%SDS 0.5mg/ml蛋白酶K在37°C消化12小时。对于CsCl2纯化的载体,使用相同的步骤,但不用DNase步骤。载体DNA煮沸5分钟,用Bio-Dot装置(Bio
. 4mls/10cm plate), add fresh trypsin/ EDTA (e.g. 1ml/10cm plate), and incubate at 37oC as appropriate to loosen cells (e.g. 1-2min for NIH3T3, 2-5min for MDCK). 3. Add 4 volumes of soybean trypsin inhibitor (1mg/ml in serum-free medium) e.g. 4mls
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