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-20℃
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99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
5ml
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文献和实验1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。E. 均匀滴上0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干。F. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。G. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。H. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。3. 组织切片 A. 常规包埋切片后,脱腊,透明。 B. PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。可在六孔板中操作。 C. 加入0.5ml
Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。 5. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。 6. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,尽量避免气泡。使细胞接触封片液,切勿弄反。 7. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。 二、悬浮细胞 1. 离心收集细胞样品于1.5 ml离心管内,加入0.5 ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 2. 离心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次
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