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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 英文名:
Huazhongilexol
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
161407-80-3
- 规格:
5mg
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文献和实验) K2HPO4 0.5 g MgSO4·7H2O 0.2 g NaCl 0.1 g 甘露(糖)醇 10.0 g 酵母膏 0.4 g 蒸馏水加至 1000 ml 108.Tomato Dextrin A gar (ATCC 965) 番茄汁 20.0 g 糊精 20.0 g 酵母膏 10.0 g CoCl2·6H2O 5.0 mg 琼脂 20.0 g 蒸馏水 1000 ml pH 7.2
,-80℃储存2个月,但是在-20℃冰冻保存将会降低转化效率。 4、粘性末端形成的氢键在低温下更加稳定,所以尽管T4 DNA连接酶的最适反应温度为37℃,在连接粘性末端时,反应温度以10-16℃为好,平齐末端则以15-20℃为好。 5、在连接反应中,如不对载体分子进行去5'磷酸基处理,便用过量的外源DNA片段(2-5倍),这将有助于减少载体的自身环化,增加外源DNA和载体连接的机会。 6、麦康凯选择性琼脂组成的平板,在含有适当抗生素时,携有载体DNA的转化子为淡红色菌落,而携有带插入片段的重组
。这时候常规做法有两 种,1.再煮5min。常规煮样时间3-5min,样品过浓时就煮10min;2.如果10min煮样后,仍然吸不起来,才适当增加SDSLB,继续煮; 也可以对样品进行超声。煮样时间若过长,蛋白会凝固,此时以失去继续WB的意义,请丢弃(判断标准:出现明显的蛋白沉淀和水分层) 此方法的缺点,SDS LB煮过的样品如果用来做IP,需要特殊方法,因此,这种制备方法制备的样品有使用局限。 非变性裂解法(不讨论诸如核抽提、亚细胞器分离等等了,其实类似) 裂解细胞请尽量
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