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99
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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
pH 0.2mol/L Tris(ml) 0.2mol/L HCl(ml) H2 O
;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。 TBS主要用于漂洗标本,常用于免疫酶技术中。 6、Tris-TBS(PBS) 试剂: Triton X-100 10ml(1%)或3ml(0.3%) 0.5mol/L Tris缓冲液(pH7.6) 1000ml(50ml
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