HEPES缓冲液;1mol/L,pH8.0,无菌，无酶;R2

RNA的定量和完整性分析

钠，5mmol/L DETA(pH8.0)4）甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置，紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose （Sigama），再加20mL 10×TAE Buffer，144mLDEPC处理过的双蒸水，微波炉中化胶，待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛，放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1） 样品制备，RNA总量10μg，5×甲醛凝胶电泳缓冲液

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25

荧光素FITC标记抗体的方法

r／min)20rain，除去其中少量的沉淀物，装入透析袋中，再置于烧杯中，用pH8．0缓冲盐水透析(0～4~C)过夜。⑤过柱 取透析过夜的标记物，通过葡聚糖凝胶SephadexG-25或G—50柱，分离游离荧光素，收集标记的荧光抗体进行鉴定。洗脱液：0．01mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．2)；过滤量：12ml标记全球蛋白液(过滤前未透析)；收集量：20ml(稀释1．7倍左右)。2．Chadwick法(1)试剂和材料 抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%碳酸钠水溶液、0．01mol/L