Tris-HCl缓冲液;0.05mol/L,pH8.9,无菌

手把手教你做好体外 DNA 重组

】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0)　25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25

荧光素FITC标记抗体的方法

r／min)20rain，除去其中少量的沉淀物，装入透析袋中，再置于烧杯中，用pH8．0缓冲盐水透析(0～4~C)过夜。⑤过柱 取透析过夜的标记物，通过葡聚糖凝胶SephadexG-25或G—50柱，分离游离荧光素，收集标记的荧光抗体进行鉴定。洗脱液：0．01mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．2)；过滤量：12ml标记全球蛋白液(过滤前未透析)；收集量：20ml(稀释1．7倍左右)。2．Chadwick法(1)试剂和材料 抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%碳酸钠水溶液、0．01mol/L