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- 文献和实验
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2-8℃
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99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500ml
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文献和实验】1. 消化缓冲液:100 mM NaCl,10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0),0.5% (w/v) SDS,0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存;2. 将 200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮,然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
/Cm:2YT 培养基中加入 25 μg/ml 氯霉素。 ( 10 ) 高速离心机(Sorvall、GS-3 和 SS -34 转子)。 ( 11 ) 悬浮缓冲液:50 mmol/L 磷酸钠、500 mmol/L NaCl,pH 7.0。 ( 12 ) Benzonase ( Sigma)。 ( 13 ) 0.45 μm 磺酸多醚注射过滤器。 ( 14 ) 2 ml 苯硼酸柱子。 ( 15 ) 硼酸缓冲液:0.5 mol/L 硼酸、0.5 mol/L NaCl
BSA。或者用含BSA使用前冲洗缓冲液膨胀凝胶颗粒BSA。让滤柱内的缓冲液流出,直到刚好低于柱床顶部,关闭凝胶柱底部的阀门,或用塑料粘土堵塞胶柱末端。 3.碘化反应前应立即准备终止管,用于终止氧化反应,保留未参与结合反应的剩余碘。1.5ml加入锥形试管50μl氯甘脲终止缓冲液 4.室温下,在通风柜内加入氯甘脲袋50μl抗体0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)配制,浓度为0.2~1mg/ml。 5.添加抗体氯甘脲试管500μCiNa,把吸液头扔进去放弃125I容器中的材料2min,时间
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