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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验g,在2~5℃下解冻,切成小块,用组织捣碎机中绞碎成胰浆,在5~10℃存放24h以上,使胰酶自身活化。胰浆中加入25%(质量分数)乙醇溶液250mL(25%乙醇溶液中加0.015mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl 2 ),捣碎机中捣碎1min。胰浆倒入500mL 烧杯 中,间隙搅拌,温度20℃左右,活化5~6h。每隔1.5h,吸取2mL活化液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。活化反应结束后,胰浆3 500 r/min离心20min,将离
离心机2.试剂( 1 ) 2%琼脂2g 琼脂加电极缓冲液100ml,水浴中溶化。( 2)电极缓冲液Tris 6g ,Gly28.8g ,SDS 2g ,去离子水溶解后,用HCl调pH值至8.3,水定容至2000ml 。( 3 ) 30% Aer Acr 30g,水溶后定容至100ml,过滤,冰箱中贮存备用。( 4 ) 1% Bis Bis 1g ,水溶后定容至100ml,过滤,冰箱中贮存。( 5)分离胶缓冲液(1.5mol/L Tris,pH8.7)Ths 15.17g,适量水溶解,然后用lmol/L
在少量蒸馏水中,再稀释至1000ml。 4. 混合指示剂 1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 5.40%氢氧化钠溶液 40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中,再稀释至100ml。 6.0.05mol/L盐酸标准溶液 (四)操作步骤 1.样品处理 精密称取0.2~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取10~20ml液体样品(约相当氮30~40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加人0.2g硫酸铜、3g硫酸
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