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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 英文名:
Aluminum-nickel alloy
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
12635-27-7
- 规格:
25g
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文献和实验,pH 7.0。 ( 16 ) 4 ml Ni-氨基三乙酸(NTA) 柱子:4 ml Ni-NTA 高流速介质(Qiagen)。 ( 17 ) 咪唑缓冲液:50 mmol/L 磷酸钠、0.25 mol/L 咪唑、50 mmol/L NaCl,pH 7.0。 ( 18 ) 磷酸缓冲液:50 mmol/L 磷酸钠、150 mmol/L NaCl,pH 7.2。 ( 19 ) EDTA。 ( 20 ) 1 ml 苯氯仿 HR 5/5 柱子(Amersham
。 点评:Chelating Sepharose FF填料是Ni-IDA类型的介质,最大的好处就是可以反复再生使用,特别是脱镍后用NaOH洗柱可以有效地去除内毒素,彻底将填料清洗干净。 150mM咪唑洗脱融合蛋白也是前期分段洗脱优化的结果,综合考虑了纯度和收率以及收样体积的因素。更低的咪唑浓度,如100-120mM咪唑也可将融合蛋白洗脱下来,但是洗脱峰很拖尾,纯度虽然好一些,可收样体积要大许多,收率也略低。 250mM咪唑洗脱杂蛋白不是此工艺中的要点。实际上,我们在操作过程中往往没有此步骤,就直接
咪唑,pH8.0,20mM PB,0.5N NaCl洗脱融合蛋白;250mM咪唑,pH8.0,20mM PB,0.5N NaCl洗脱杂蛋白。 点评:Chelating Sepharose FF填料是Ni-IDA类型的介质,最大的好处就是可以反复再生使用,特别是脱镍后用NaOH洗柱可以有效地去除内毒素,彻底将填料清洗干净。 150mM咪唑洗脱融合蛋白也是前期分段洗脱优化的结果,综合考虑了纯度和收率以及收样体积的因素。更低的咪唑浓度,如100-120mM咪唑也可将融合
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