Mepiroxol;6968-72-5;10mM in DM

常用分子生物学实验方法

2.7.1PCR 鉴定体系 10X Taq buffer 3 ul 4X dNTP (10mM) 0.5 ul Taq DNA polymerase(5U/ul) 0.2ul(1U) 10uM引物 (双向) 各1ul 50%DMSO(which is optional) 1ul 模板：过夜菌液 / 挑单克隆 2ul 加灭菌水至 30ul 2.7.2 PCR 鉴定程序： 94℃ 5min 94℃ 30s 30cycle 55℃ 30s 72℃ 3min 72℃

cDNA文库组标准流程

I adaptor 加接 : 1. 往双链cDNA沉淀中加入9μl EcoR I adaptor(400ng/μl)，4℃至少放置30分钟以充分溶解cDNA沉淀; 2. 溶解完成后，顺序加入下列试剂: 1.2μl   10×Ligase Buffer 1μl    10mM rATP 1μl    T4 DNA Ligase(4U/μl) 3. 混匀后，4℃连接3days，或者8℃过夜连接;五、双链 cDNA 末端的磷酸化及 Xho I 酶切 : 1. 连接反应完成后,将反应体系70℃放置15

Stripping Western Blots

. 4mls/10cm plate), add fresh trypsin/ EDTA (e.g. 1ml/10cm plate), and incubate at 37oC as appropriate to loosen cells (e.g. 1-2min for NIH3T3, 2-5min for MDCK). 3. Add 4 volumes of soybean trypsin inhibitor (1mg/ml in serum-free medium) e.g. 4mls