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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
CL-380803
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
297148-55-1
- 规格:
1ml
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文献和实验Wholemount in situ hybridisation
). Incubate at 37°C for 15 minutes. Pack a Sephadex G50 column equilibrated with 0.1% SDS, 50mM Tris.Cl (pH 7.5), 0.5mM EDTA (TES) by loading a 1ml syringe barrel (plugged with glass or plastic wool) and spinning @ 1500rpm 90sec. Dilute probe
液中,再移至50ml离心管中; 5. 加入1ml用10mM Tris.Cl (pH 8.0)新鲜配制的溶菌酶溶液(10mg/ml),混合后室温孵育30min; 6. 加入15ml新鲜配制的细胞裂解液,上下颠倒混合直至溶液变黏稠为止; 7. 加入10ml预冷的中和液,上下颠倒混匀,冰浴10min; 8. 12,000rpm,4℃离心20min; 9. 将上清通过四层消毒纱布滤入另一50ml离心管中,加入0.6倍体积的异丙醇,室温放置10min,12,000rpm,室温离心5min
Promega公司的RibocloneR M-MLV(H- ) cDNA合成系统采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶,使合成的cDNA更长。该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶,cDNA第二链合成采用置换合成法,采用RNaseH和DNA聚合酶Ⅰ进行置换合成,最后用T4 DNA聚合酶切去单链末端,方法简便易行。该系统试剂包括:20μg 特异性引物 200μl M-MLV第一链缓冲液(5×),配方如下: 250mmol/L Tris·Cl pH8.3(37℃时
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