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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
PF 06273340
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
1402438-74-7
- 规格:
1ml
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文献和实验In Situ HYBRIDIZATION TO TISSUE SECTIONS
1.0ml 10mM rGTP 1.0ml 0.5mM rUTP 1.0ml 0.75M DTT 1.0ml RNase-Block (25U/ml) 2.5ml 35S-rUTP (100mCi) 1.0ml T3 or T7 polymerase (10U) Vortex, spin down and incubate 1-2h @ 30 degrees C. Incorporation should be 70-90%. Determine
,说明两等位基因均出现C到T的突变,为-159T/T纯合子,无166bp而被消化成较小的片段则为-159C/C的纯合子,出现含166又有酶切片段是-159C/T杂合子 。 单个核细胞的分离:空腹抽取外周全血,用ACD抗凝,小心加在同体积的淋巴细胞分离液上,以500g离心30 min。小心取出离心管,可见离心管中部有一水平的白色混浊区,用1ml移液器小心吸出中间层白色细胞,用PBS/EDTA缓冲液洗涤2次,用ACK缓冲液裂解残留的红细胞。以550g离心10min得到的细胞沉淀即为单个
I adaptor 加接 : 1. 往双链cDNA沉淀中加入9μl EcoR I adaptor(400ng/μl),4℃至少放置30分钟以充分溶解cDNA沉淀; 2. 溶解完成后,顺序加入下列试剂: 1.2μl 10×Ligase Buffer 1μl 10mM rATP 1μl T4 DNA Ligase(4U/μl) 3. 混匀后,4℃连接3days,或者8℃过夜连接;五、双链 cDNA 末端的磷酸化及 Xho I 酶切 : 1. 连接反应完成后,将反应体系70℃放置15
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