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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
Praeruptorin E
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
78478-28-1
- 规格:
1ml
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文献和实验标准化实验Protocol:肝脏类器官(HML)MASLD模型构建及药物性肝损伤(DILI)评价全流程参照!
,批量收集样本,适配转录组/蛋白组/代谢组、流式、药物代谢定量。 质前置细胞单独培养标准化操作(3套独立细胞培养方案) 方案1:分化型HepaRG肝细胞培养 ① 完全培养基配制(500mL) 威廉姆斯E+GlutaMAX基础培养基+1×青链霉素+5μg/mL胰岛素+50μM氢化可的松半琥珀酸酯+10%胎牛血清(FBS) ②传代扩增:T75瓶接种密度2×10⁶细胞/瓶,常规胰酶消化传代。 ③长达28天梯度分化(核心步骤) D0~14:基础完全培养基培养 D14:更换含1%DMSO
1. 接种前可将完全培养基置于培养箱平衡 15 min 以上,使 pH 稳定在 7.0-7.6。 2. 消化时避免摇晃培养瓶,可 37℃ 孵育加速消化。 3. 血清蛋白可竞争性抑制胰酶活性。 4. 传代比例为 1:4-1:8。 5. 冻存密度控制在 1-10×10? cells/mL。 6. DMSO 需最后添加,加完后迅速转移至低温环境梯度冻存。 Caco-2 细胞 人结肠腺癌细胞,贴壁生长,为多边形或梭形,增殖速度较快[15]。 培养条件:DMEM
。当然7-AAD会优于PI,因为PI的细胞毒性会更大,而且在流式上的图形也不会像7-AAD漂亮。可以试试。12、受试物的浓度和水溶性问题: 问:向大家请教受试物的问题: (1)我采用是大鼠睾丸支持细胞,染毒的物质是有机磷农药,不溶于水。请问应采用什么样的有机溶剂作为溶剂,要注意什么? (2)如何确定有机磷农药的染毒浓度? 答:可以试试DMSO,千分之一体积,不会影响细胞。eg.需要10uM的药液,用DMSO将药配成10mM的储备液,用的时候1000倍稀释。 13、血液中提取单核细胞后的保存问题
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