4-氨基-2,6-二甲氧基嘧啶;3289-50-7;10mM

质粒DNA的提取与鉴定

.含pUC18质粒的大肠杆菌 附：试剂的配制 1.溶液Ⅰ 50mmol/L 葡萄糖 5mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris) Tris·HCl (pH8.0) 10mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0) 2.溶液Ⅱ 0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合 3.溶液Ⅲ 5mmol/L 乙酸钾 60 ml 冰乙酸 11.5 ml 水

【原创】表达蛋白的分离与纯化

的这些物理性质上的差异使它们得以能进行纯化但这也意味着需要对每一种待纯化的蛋白质研发一套新的方法。所幸的是，尽管存在这种固有的困难，但现已有多种方法可以利用，蛋白质纯化策略也已实际可行。目前，待研究蛋白或酶的基因的获得已是相当普遍的事。可诱导表达系统特别是Studier等发展的以噬菌体T7RNA聚合酶为基础的表达系统的出现使人们能近乎常规地获得过表达（overexpression），表达水平可达细胞蛋白的2%以上，有些甚至高达50%。 一、可溶性产物的纯化（融合T7•Tag的表达蛋白） （一）试剂

大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法

μl转入50ml LB培养基中（250ml 锥形瓶），37 ℃，250rpm培养2小时，此时OD600约0.4—0.5。 3、 吸取1ml菌液到1.5ml离心管里，5000rpm离心5分钟，弃去上清。 4、 加入100μl预冷的Solution A，悬浮菌体，冰浴30分钟。 5、 此时感受态细胞已经制成可立即使用或-70℃保存。 注意事项： 1、 所用器具一定要清洁； 2、 操作步骤2 中培养基的装量也是很重要的，建议装量不要高于此值：500ml 锥形 瓶装100ml培养基，250