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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃,充氩(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
3-Chlorobenzhydrazide
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
1673-47-8
- 规格:
1ml
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文献和实验磨成粉末状。 2. 将粉末倒入盛有3ml变性裂解液的50ml离心管中,充分匀浆。(1g样品加入3ml变性裂解液)。 3. 加入0.3ml(1/10体积)2M的NaAc(ph4-5)颠倒混匀。 4. 加入3ml(等体积)的水饱和酚,充分振荡,再加入1ml(1/3)的氯仿,振荡。 5. 冰浴10min。4℃,12000g离心10min 6. 小心转移上清于另一离心管中,加入2倍体积的无水乙醇,-70℃沉淀至少1小时。 7. 4℃,12000g离心20min。 8. 去上清,取沉淀。加1ml 4M的LiCl 溶解
; 0.5mg/ml BSA。500μ RNase H500μ DNA聚合酶Ⅰ100μ T4 DNA聚合酶Ⅰ2×1.25ml 不含核酸酶的水以上所有试剂除对照RNA需在-70℃保存外,其余均可保存于-20℃,可以合成40μg mRNA。(一) 第一链合成 1. 试剂 [α-32 P] dCTP (>400Ci/mmol),EDTA (50mM和200mM),TE-饱和酚:氯仿(1:1),7.5M NH4Ac,乙醇(100%和70%),TE缓冲液。2. 操作步骤 (1) 取一灭菌的无RNA
2、研磨液室温放置5分钟,然后以每1mlTrizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒。 3、取上层水相于一新的离心管,按每mlTrizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g离心10分钟。 4、弃去上清液,按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇,涡旋混匀,4℃下7500g离心5分钟。 5、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5-10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度。然后将RNA
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