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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 英文名:
pLenti-H1-4-sgRNA
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
100μg
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文献和实验酶活性检测: A、取Ac-特异性多肽-pNA和2 ×反应液,溶解后冰浴备用。 B、 2 ×反应液工作液制备:每50 μL 2 ×反应液加入0.5 μL DTT。 C、吸取45 μL含100-200 μg蛋白的细胞或者组织裂解上清,如体积不足45 μL则用裂解液工作液补足至45 μL(各组采用相同的蛋白含量和体系进行测定和比较)。 D、按照下表设置反应体系: 注意: 1) 在设置反应体系时先加入反应工作液,再加入待测样本后适当混匀,注意避免产生气泡。 2) 最后加入Ac-特异性多肽-pNA
污剂(表面活性剂)进行处理,溶解细胞膜并溶解蛋白质。50mmol/L Tirs-HCl(PH 8.0)、150mmol/L NaCl、0. 02% 叠氮钠、100μg/ml PMSF、1μg/ml Aprotinin、1% Triton X-100 ( or NP-40) ,这种裂解液可能是最常用的裂解缓冲液。13. 细胞裂解液的主要目的: (1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞; (2)溶解蛋白; (3)蛋白变性使其稳定; (4)抑制蛋白酶活性。 推荐RIPA buffer:50
Tirs-HCl(PH 8.0)、150mmol/L NaCl、0. 02% 叠氮钠、100μg/ml PMSF、1μg/ml Aprotinin、1% Triton X-100 ( or NP-40) ,这种裂解液可能是最常用的裂解缓冲液。13、细胞裂解液的主要目的:(1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;(2)溶解蛋白;(3)蛋白变性使其稳定;(4)抑制蛋白酶活性。推荐RIPA buffer:50 mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM
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