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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
Thiol-PEG-Amine,NH2-PEG-SH
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
100mg
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
得到:1 A280 =1.62 mg/ml。 4. 酶活力测定 1) 氨基酸活化反应的条件如下:35ul反应液中含有100 mM HEPES (pH 7.8),10mM KF,10 mM MgCl2 ,4 mM ATP,2 mM [32 P] PPi和1 mM亮氨酸,在37o C保温,用约4 nmol/L LeuRS起始反应,于不同时间,取出15ul反应液,加入200ul淬灭液中(3.5%高氯酸,2%活性炭和0.05 M焦磷酸钠)停止反应,在淬灭液中再加入5毫升10 mM焦
不同的分子比来筛选最适条件; 3. 用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活; 4. 由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如Triton X-100,Tween 20等。 5. 当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性。此时,应试用其它交联方法; 6. 生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价
3. 用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活。 4. 由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如Triton X-100,Tween 20等。 5. 当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性。此时,应试用其它交联方法。 6. 生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合。 7. 交联反应后,应充分透析
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